Partie II
Matériels et méthodes
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II.4-3) Les analyses biochimiques :
Afin de déterminer le teneur en lipide et le taux de protéine dans les trois aliments
fabriqués, une analyse a été faite au laboratoire de Biochimie au niveau de l’ENSSMAL.
1- Dosage des protéines :
L’extraction et le dosage des protéines ont été effectués selon la méthode de
référence « Kjeldhal », elle s’effectue en trois étapes :
La 1
re étape - la minéralisation :
Son but est de dégrader la matière organique azotée sous la forme de sel d'ammonium.
Équation de minéralisation : M organique
NH 4
+ .
-Le pH acide permet au sel d'ammonium d'apparaître sous sa forme acide de l'ammonium
NH 4
+ .
-La dégradation de la matière organique azoté se fait à l'aide d'un catalyseur (sélénium Se
et sulfate de potassium), de l'acide sulfurique à haute température.
La 2
eme étape - la distillation :
Avant de distiller l’ammoniac à la vapeur d’eau, on doit libérer l’ammoniac sous la forme
du sel (NH 4 ) 2 SO 4 par l’addition d’une solution concentrée de soude (NaOH) en excès :
-L’ammoniac est ensuite distillé par la vapeur la vapeur d’eau et piégé dans la solution
d’acide borique.
-L’ammoniac réagit avec l’acide borique pour former des sels de borate d’ammonium.
La 3
ème étape – Titrage :
Le borate d’ammonium est titré directement à l’aide d’une solution standardisée d’acide
chlorhydrique (HCl), et un indicateur (le Tashiro).
Figure II.22 : Les étapes de dosage des protéines.