Suivi des paramètres biogéochimiques au large de Raïs Hamidou |Matériel et Méthodes
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Dans notre travail, nous avons opté pour la méthode spectrophotométrique à cause de la
disponibilité du matériel nécessaire.
Le principe de la méthode
La mesure des pigments phytoplanctoniques repose sur leurs caractéristiques
spectroscopiques : absorption de lumière (spectrophotométrie). Contenue dans les cellules, la
chlorophylle « a » est un paramètre « particulaire » qui, pour une mesure précise en laboratoire,
nécessite la récolte du matériel en suspension par filtration, suivie d'une extraction du filtre par
solvant puis par le passage de ce dernier au spectrophotomètre (Figure 19) (Aminot & Kerouel,
2004).
La méthode est basée sur la mesure de l’absorbance de l’échantillon avant et après
acidification.
Echantillonnage
L’échantillonnage de la chlorophylle « a » s’est fait en dernier, dans des bouteilles en
plastiques de 1,5 L, pour les différentes profondeurs de prélèvement.
Les échantillons d’eau de mer sont placés à l’abri de la lumière (dans une glacière munie de
pains de glace).
Réactifs
La mesure de la chlorophylle « a » repose sur la préparation des réactifs suivants (les détails
sont en Annexe n°3) :
- Solvant d'extraction : acétone analytique à 90%.
- Solution d'acide chloridrique à 0,3 N.
Mode opératoire
L’analyse de la chlorophylle nécessite une protection permanente contre la lumière durant
toutes les étapes du protocole analytique, car ces pigments sont photosensibles.
Figure 19: Spectrophotométrie visible-UV