Chapitre III : Matériels et méthodes
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III.3.6.2) Analyse automatique des sels nutritifs :
Dosage des nitrites : Les nitrites (NO2
-
) forment un diazoïque par action avec la
sulfanilamide en milieu acide pH<2. Ce composé formera ensuite en présence de Nnaphtylethylénediamine un composé azoïque de couleur rose absorbant la lumière à 540
nm (Benschneider, Robinson, 1952, Skalar, 1998).
Dosage des nitrates : La méthode est basée sur la réduction des nitrates (NO 3
-
) en nitrites
(NO 2
-
) par le passage de l’échantillon à travers une colonne réductrice de cadmium traité
au cuivre (Wood, 1967). Les nitrites (en réalité NO 2
- + NO 3
- réduits) seront ensuite dosés
par colorimétrie selon la méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la
concentration des nitrites déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la
colonne réductrice) pour trouver les concentrations des nitrates (Rodier et al, 1996).
Dosage des orthophosphates : En présence d’antimoine oxytartrate de potassium à une
température de 40° C (bain-marie), les ions orthophosphates (PO 4
3 -
) réagissent avec le
molybdate d’ammonium pour former un complexe antimoine phosphomolybdique qui
sera réduit par l’acide ascorbique (Murphy, Riley, 1962). Cette forme réduite de
coloration bleue a un maximum d’absorption à 880 nm.
Dosage du silicium dissous : Dans l’eau de mer, le silicium dissous se trouve à 95 % sous
forme d’acide orthosilicique Si(OH)4 (Aminot, Chaussepied, 1983). Cette forme réagit
avec le molybdate d’ammonium en milieu acide pour former un complexe
silicomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique en un composé coloré en bleu
absorbant à 810 nm. On y ajoute l’acide oxalique pour éviter les interférences des
phosphates.
Etalonnage : Cette opération nécessite la préparation d’une solution mère puis de
solutions filles pour chaque élément à analyser (voir annexe IV.1.1).
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les
concentrations connues des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes
(voir annexe IV.1.2).
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III.3.6.2) Analyse automatique des sels nutritifs :
Dosage des nitrites : Les nitrites (NO2
-
) forment un diazoïque par action avec la
sulfanilamide en milieu acide pH<2. Ce composé formera ensuite en présence de Nnaphtylethylénediamine un composé azoïque de couleur rose absorbant la lumière à 540
nm (Benschneider, Robinson, 1952, Skalar, 1998).
Dosage des nitrates : La méthode est basée sur la réduction des nitrates (NO 3
-
) en nitrites
(NO 2
-
) par le passage de l’échantillon à travers une colonne réductrice de cadmium traité
au cuivre (Wood, 1967). Les nitrites (en réalité NO 2
- + NO 3
- réduits) seront ensuite dosés
par colorimétrie selon la méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la
concentration des nitrites déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la
colonne réductrice) pour trouver les concentrations des nitrates (Rodier et al, 1996).
Dosage des orthophosphates : En présence d’antimoine oxytartrate de potassium à une
température de 40° C (bain-marie), les ions orthophosphates (PO 4
3 -
) réagissent avec le
molybdate d’ammonium pour former un complexe antimoine phosphomolybdique qui
sera réduit par l’acide ascorbique (Murphy, Riley, 1962). Cette forme réduite de
coloration bleue a un maximum d’absorption à 880 nm.
Dosage du silicium dissous : Dans l’eau de mer, le silicium dissous se trouve à 95 % sous
forme d’acide orthosilicique Si(OH)4 (Aminot, Chaussepied, 1983). Cette forme réagit
avec le molybdate d’ammonium en milieu acide pour former un complexe
silicomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique en un composé coloré en bleu
absorbant à 810 nm. On y ajoute l’acide oxalique pour éviter les interférences des
phosphates.
Etalonnage : Cette opération nécessite la préparation d’une solution mère puis de
solutions filles pour chaque élément à analyser (voir annexe IV.1.1).
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les
concentrations connues des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes
(voir annexe IV.1.2).