Chapitre II : Matériels et méthodes
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II.4.3.3. Dénombrement des Streptocoques fecaux selon la norme (ISO 7899-2 NA 766) :
Le dddooooeeeet des eetttooooues est foodd suu la filttatioo de l’’’haatilloo à aaallsee à ttavees
une membrane filtrante ayant une porosité de 0,45 0m suffisante pour retenir les bactéries.
Le filtre est placé sur un milieu ssleetif solide ooteeaat de l’azotuue de sodiuu pouu supppiiee la
croissance des bactéries gram-négatif et du chlorure de 2, 3,5-triphenyltetrazolium, qui est réduit en
formazan rouge par les entérocoques intestinaux.
Les colonies typiques sont bombées, de couleur rouge, marron ou rose, soit au centre ou sur
l’eeseeele de la olooie.
Pouu oofiiiatioo de la pppseeee d’eetttooooues, le filtte est eesuite ttaasffff suu la gglose
ooteeaat de la ile et de l’essuliie B.E.AA, ui est hhddollss paa les eetttocoques, donnant une
coloration noire en se combinant à des sels de fer (ISO 7899-2 NA 766) .
A. Appareillage utilisé pour la filtration :
 Rampe de filtration en acier inoxydable stérilisée à la flamme avant chaque analyse.
 Pompe sous vide.
 Pinces.
 Bec Bunsen.
 Meeeeaae de filttatioo stttile de ...
de pooositt.
 Etuve à
C et
.. C.
 Bain marie maintenue à 100° C.
 Boîtes de Pétri de diamètre 55 mm.
 Pipettes pasteur.

uues à essais ooteeaat
l d’eau phhsiologiiue stttile.
B. Milieux de cultures et Reactifs (ISO 7899-2 NA 766) :
 Gélose de Slanetz et Bartley .
 Additif T.T.C (chlorure 2, 3,5 triphényl-tétrazolium).
 Gélose Bile Esculine Azoture (B. E. A) .
C. Préparation des milieux de culture :
 Utiliser un bain marie à une température de 100° C.
 Faire fondre le flacon de 250 ml contenant la gélose stérile de Slanetz et Bartley.
 Refroidir à une température de 50°C.