Chapitre II :
Matériel et méthodes.
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Figure II.4 : Fixation des Nauplii pour faire le comptage (SOLTANI, 2017).
II.5 Protocoles de détermination de la flore bactérienne
L’analyse microbiologique a concerné l’élevage d’Artemia sauvage et commerciale : les
cystes vides, les naupli fraichement éclos et les cystes non éclos.
II.5.1 Recherche des Pseudomonas
 Principe (Guiraud J-P, 2006) : On utilise un milieu sélectif (Cétrimide) et deux
milieux de confirmation, à savoir le King A et le King B pour déterminer les
espèces Ps. aeruginosa, Ps. fluorescens des autres espèces.
 Mode opératoire
- Etalement de 0.1ml d’échantillon à la surface de la gélose au Cétrimide
- Après incubation à 37°C pendant 24h, les colonies présomptives d’être
Pseudomonas (colonie bleu verte, colonie fluorescente sous UV, colonie avec
pigment rouge ou brun), Ont été ensemencées sur les milieux King A et King B.
 Lecture : Après une incubation à 37°C pendant 5jours, l’apparition du pigment
bleu vert (pyocyanine) sur King A et un pigment vert (pyoverdine) sur King B
indique la présence de Ps. aeruginosa et la seule présence du pigment vert sur King
B indique la présence de Ps.fluorescens.
 La confirmation de l’identification a été faite par le test d’oxydase, coloration de
Gram et galerie API 20 E.