Matériels et méthodes
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-l’addition du sel de sulfate de potassium K2SO4 a pour but d’élever le point d’ébullition de
la solution pour accélérer la réaction de minéralisation de la matière organique.
-le catalyseur utilisé est le sulfate de cuivre CuSO4.
La réaction chimique est la suivante :
H2SO4 + N (aliment) SO4(NH4)2.
Etape 2 : Distillation de l’ammoniac
Avant de distiller l’ammoniac à la vapeur d’eau, on doit le libérer par l’addition d’une solution
concentrée de soude NaOH en excès. La transformation chimique est :
SO4(NH4)2 + 2NaOH SO4Na2 + 2NH4OH.
L’ammoniac est ensuite distillé par la vapeur d’eau et piégé dans une solution d’acide borique.
L’ammoniac réagit avec l’acide borique pour former des sels de borates d’ammonium.
La transformation chimique est :
NH4OH + H3BO3 BO3H2NH4 + H2O (sel borate d’ammonium).
Etape 3 : Titrage de l’ammoniac
L’ammoniac sous la forme de borate d’ammonium est titré directement à l’aide d’une solution
standardisée d’acide chlorhydrique HCl, et d’un indicateur (le Tashiro) :
BO3H2NH4 + HCl NH4Cl + H3BO3
2.4.1.3. Mode opératoire
a. Minéralisation
La minéralisation permet de dénaturer les protéines (casser les liaisons) et de libérer les acides
aminés, ensuite transformer l’azote organique en azote minéral.
Elle est effectuée à l’aide d’un appareil de minéralisation « Inkjel. M, Behr labor-technik
Gmbh » équipé : d’une plaque chauffante, un porte matras, un collecteur de fumée et un
thermostat. Tout le système est relié à une pompe à vide qui est relié à un piégeur de fumée
(Figure 4, Annexe 1).
Dans un matras de Kjeldahl, on met :
- 2 g de l’échantillon de poisson lyophilisé, 7 g de sulfate de potassium K2SO4, 5 mg de
sulfate de cuivre CuSO4 et 1ml d’eau oxygénée H2O2 à 60%(10Vol), 10ml d’acide
sulfurique H2SO4 concentré et 2-3 petits morceaux de pierre ponce ;
- On agite et on place le matras dans le dispositif de minéralisation ;
- On chauffe doucement et progressivement jusqu'à l’apparition des fumées noires ;
- On poursuit le chauffage durant 30 à 45 minutes jusqu'à l’obtention d’une couleur limpide.
A la fin de la minéralisation, on laisse les matras refroidir.
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-l’addition du sel de sulfate de potassium K2SO4 a pour but d’élever le point d’ébullition de
la solution pour accélérer la réaction de minéralisation de la matière organique.
-le catalyseur utilisé est le sulfate de cuivre CuSO4.
La réaction chimique est la suivante :
H2SO4 + N (aliment) SO4(NH4)2.
Etape 2 : Distillation de l’ammoniac
Avant de distiller l’ammoniac à la vapeur d’eau, on doit le libérer par l’addition d’une solution
concentrée de soude NaOH en excès. La transformation chimique est :
SO4(NH4)2 + 2NaOH SO4Na2 + 2NH4OH.
L’ammoniac est ensuite distillé par la vapeur d’eau et piégé dans une solution d’acide borique.
L’ammoniac réagit avec l’acide borique pour former des sels de borates d’ammonium.
La transformation chimique est :
NH4OH + H3BO3 BO3H2NH4 + H2O (sel borate d’ammonium).
Etape 3 : Titrage de l’ammoniac
L’ammoniac sous la forme de borate d’ammonium est titré directement à l’aide d’une solution
standardisée d’acide chlorhydrique HCl, et d’un indicateur (le Tashiro) :
BO3H2NH4 + HCl NH4Cl + H3BO3
2.4.1.3. Mode opératoire
a. Minéralisation
La minéralisation permet de dénaturer les protéines (casser les liaisons) et de libérer les acides
aminés, ensuite transformer l’azote organique en azote minéral.
Elle est effectuée à l’aide d’un appareil de minéralisation « Inkjel. M, Behr labor-technik
Gmbh » équipé : d’une plaque chauffante, un porte matras, un collecteur de fumée et un
thermostat. Tout le système est relié à une pompe à vide qui est relié à un piégeur de fumée
(Figure 4, Annexe 1).
Dans un matras de Kjeldahl, on met :
- 2 g de l’échantillon de poisson lyophilisé, 7 g de sulfate de potassium K2SO4, 5 mg de
sulfate de cuivre CuSO4 et 1ml d’eau oxygénée H2O2 à 60%(10Vol), 10ml d’acide
sulfurique H2SO4 concentré et 2-3 petits morceaux de pierre ponce ;
- On agite et on place le matras dans le dispositif de minéralisation ;
- On chauffe doucement et progressivement jusqu'à l’apparition des fumées noires ;
- On poursuit le chauffage durant 30 à 45 minutes jusqu'à l’obtention d’une couleur limpide.
A la fin de la minéralisation, on laisse les matras refroidir.