Chapitre III
MATERIELS ET METHODES
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Un dispositif de filtration sous vide de marqueBALL VALVE(Photo 9).
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Une centrifugeuse de marque SIGMA (Photo 14).
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Un spectrophotomètre de marque JASCO V-730 (Photo 15 ).
2.1.3.3
Mode opératoire
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Mettre en place le dispositif de filtration.
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Rincer le dispositif de filtration à l’eau distillée.
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Placer les filtres sur le dispositif de filtration.
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Homogénéiser l’échantillon.
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Verser 500ml de l’échantillon et appliquer le vide.
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Conserver le filtre à l’abri de la lumière et le congeler.
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Mettre le filtre dans un tube à centrifuger contenant de 10 ml d’acétone à 90%.
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Déchiqueter le filtre à l’aide d’une tige en verre.
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Déposer les tubes au réfrigérateur une nuit pour l’extraction des pigments.
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Centrifuger 5 min à 3500 tr/min, retirer les tubes et faire chuter les fibres de
verre qui collent sur la paroi du tube.
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Centrifuger à nouveau 10 min à 3500 tr/min.
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Mesurer l’absorbance avant et après acidification à 665 nm et à 750 nm.
Remarque : le filtre et l’extrait doivent être conservé à l’abri de la lumière
Photo 14: La centrifugeuse de
marque SIGMA
Photo 15: Le spectrophotomètre de
marque JASCO V-730.