Annexes
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Appareillage et matériel
Le matériel utilisé dot être exempt de toute trace de contaminant organique, inorganique ou
biologique. Une procédure de lavage adéquate est de rigueur.
 Equipement de filtration de marque « Sartorius stedim » avec filtres en fibre de verre (GF/F,
de porosité environ 0.45µm et de diamètre 25mm).
 Tubes de mesure en verre.
 Centrifugeuse Hettich ZENTRIFUGEN de type EBA 30, avec 12 postes de porte-Filtre.
 Spectrophotomètre fluorescence de marque HITACHI, modèle 650 S, équipé d’une
lampe « Xénon » qui est la source du rayonnement UV.
 Cuve en quarts de 1 cm de trajet optique, éprouvettes.
Réactifs et étalons
 Solution de méthanol pur à 99.7% pour l’extraction.
 Solution de carbonate de magnésium (MgCO3) à 1% (Ajouter 1g de MgCO3 en poudre fine
dans 100 ml d’eau déminéralisée.
 Solution mère de chlorophylle a à une concentration de 0.1 µg/l (conserver au congélateur)
 Solutions étalons de chlorophylle a dans méthanol 99.7 %, à des concentrations de 2, 5, 10,
15, 20 µg/l.
 Acide chlorhydrique (HCL) 0.5 N.
Protocole analytique
 Appliquer 2 ml de solution de carbonate de magnésium sur une membrane (Whatman GF/F)
de 0.45 µm, et filtrer 250ml de l’échantillon avec une pression inférieure à 100 mmHg.
 Le filtre est plié sur quatre et enrobé dans du papier aluminium déjà étiqueté. Ensuite les filtres
sont conservés dans un congélateur.

Ajouter 6 ml de méthanol à 99.7 % dans les tubes qui contiennent les échantillons à doser.
 Les tubes sont ensuite bouchés et placés à l’obscurité dans un réfrigérateur (5°C). pour une
période d’extraction de 30 minutes.
 Homogénéiser les échantillons on les plaçant dans une centrifugeuse pendant 5 min et 3000
tours/min.
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