Chapitre III
Matériels et Méthodes
36
La colorimétrie est basée sur la loi de Beer-Lambert qui définit comme suit :
A = D.O = log (I0 –I) =í µí¼º.L.C…III.6
I0 et I : sont respectivement les intensités lumineuses incidentes et du milieu absorbant.
í µí¼º : Le coefficient d’extinction molaire variant en fonction de la température et la longueur d’onde.
L : la Longueur du milieu traversé exprimé en cm.
C : Concentration de la solution absorbante exprimée en mol/l.
A : Absorbance de la solution.
D.O : Densité Optique de la solution.
5.1.2. Analyse automatique des sels nutritifs
Dosage des nitrites
Les nitrites (NO2
-
) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide en milieu acide pH<2.
Ce composé formera ensuite en présence de N-naphtylethylénediamine un composé azoïque de
couleur rose absorbant la lumière à 540 nm.
Dosage des nitrates
La méthode est basée sur la réduction des nitrates (NO3
-) par le passage de l’échantillon à travers
une colonne réductrice de cadmium traité au cuivre. Les nitrites (en réalité NO2
- + NO3
- réduits)
seront ensuite dosés par colorimétrie selon la méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en
déduire la concentration des nitrites déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la
colonne réductrice) pour trouver les concentrations des nitrates (Rodier et all.1996).
Dosage des orthophosphates
En présence d’antimoine oxytartrate de potassium à une température de 40°C (bain marie), les
ions orthophosphates (PO4
-3
) réagissent avec le molybdate d’ammonium pour former un
complexe antimoine phosphomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique (Murphy et
Riley, 1962). Cette forme réduite de coloration bleue à un maximum d’absorption à 880nm.
Dosage de silicium dissous
Dans l’eau de mer, le silicium dissous se trouve à 95 % sous forme d’acide orthosilicique (Si(OH)4
) (Aminot et Chaussepied, 1983).Cette forme réagit avec le molybdate d’ammonium en milieu
acide pour former un complexe silicomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique en un
composé coloré en bleu absorbant à 810 nm (Mullin et Riley, 1955). On y ajoute d’acide oxalique
pour éviter les interférences des phosphates (Annexe III).
Matériels et Méthodes
36
La colorimétrie est basée sur la loi de Beer-Lambert qui définit comme suit :
A = D.O = log (I0 –I) =í µí¼º.L.C…III.6
I0 et I : sont respectivement les intensités lumineuses incidentes et du milieu absorbant.
í µí¼º : Le coefficient d’extinction molaire variant en fonction de la température et la longueur d’onde.
L : la Longueur du milieu traversé exprimé en cm.
C : Concentration de la solution absorbante exprimée en mol/l.
A : Absorbance de la solution.
D.O : Densité Optique de la solution.
5.1.2. Analyse automatique des sels nutritifs
Dosage des nitrites
Les nitrites (NO2
-
) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide en milieu acide pH<2.
Ce composé formera ensuite en présence de N-naphtylethylénediamine un composé azoïque de
couleur rose absorbant la lumière à 540 nm.
Dosage des nitrates
La méthode est basée sur la réduction des nitrates (NO3
-) par le passage de l’échantillon à travers
une colonne réductrice de cadmium traité au cuivre. Les nitrites (en réalité NO2
- + NO3
- réduits)
seront ensuite dosés par colorimétrie selon la méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en
déduire la concentration des nitrites déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la
colonne réductrice) pour trouver les concentrations des nitrates (Rodier et all.1996).
Dosage des orthophosphates
En présence d’antimoine oxytartrate de potassium à une température de 40°C (bain marie), les
ions orthophosphates (PO4
-3
) réagissent avec le molybdate d’ammonium pour former un
complexe antimoine phosphomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique (Murphy et
Riley, 1962). Cette forme réduite de coloration bleue à un maximum d’absorption à 880nm.
Dosage de silicium dissous
Dans l’eau de mer, le silicium dissous se trouve à 95 % sous forme d’acide orthosilicique (Si(OH)4
) (Aminot et Chaussepied, 1983).Cette forme réagit avec le molybdate d’ammonium en milieu
acide pour former un complexe silicomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique en un
composé coloré en bleu absorbant à 810 nm (Mullin et Riley, 1955). On y ajoute d’acide oxalique
pour éviter les interférences des phosphates (Annexe III).