Chapitre III
Matériel et Méthodes
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III.8. Analyse des hydrocarbures aromatiques polycycliques dans le biote (Kim et al ;
2014) modifié
Les principales étapes de traitement pour faire l’analyse des hydrocarbures dans le biote
(moule et patelle) sont :
 Lyophilisation (-50à -60°C ,10-1 bar).
 Broyage (broyeur automatique en acier inoxydable)
 Extraction Soxhlet pendant 8 heures (mélange binaire Hexane / acétone ; 50/50)
 Concentration à 10ml (évaporateur rotatif)
 Purification et fractionnement sur colonne
 Fraction aromatique de 10ml
 Concentration sous jet d’azote
III.8.1. Lyophilisation
La lyophilisation c’est le passage de l’eau sous forme solide (état de cristaux) directement
sous forme gazeuse ; appelée sublimation. Cette étape permet de déshydrater l’échantillon à
froid. Les échantillons des patelles et des moules ont été passés au lyophilisateur (CHRIST
BETTA 1-8) (Figure voir annexe) à -50°C avec une pression sous cloche de 10
-1 bar pendant
48 heures.
III.8.2. Broyage et homogénéisation
La chair des patelles lyophilisée est broyée à l’aide d’un broyeur automatique en acier
inoxydable jusqu’à l’obtention d’une poudre fine. Après broyage, les échantillons sont
homogénéisés avec un agitateur vibrant et stockés dans un endroit sec (dessiccateur en
présence de gel de silice activé). Cette étape permet de libérer les polluants incrustés dans les
particules du biote marin (les patelles et les moules).
III.8.3. Extraction solide-liquide
Un dispositif appelé batterie d’extraction ou Soxhlet, est indispensable pour l’extraction
des hydrocarbures (Figure III.11). Cette opération permet de récupérer, par lessivage, tous
les hydrocarbures contenus dans le biote (patelles et moules) avec un mélange de solvants.
Celui-ci se compose d’hexane et d’acétone dans les proportions 50:50. Le volume de solvant
consommé est de 150 ml. Des grains "boiling ships" sont introduits avec les solvants pour
obtenir une température homogène comprise entre 65 et 72°C dans toute la phase organique.