Chapitre III
Matériel et Méthodes
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2.3.6 La mesure de la chlorophylle
 Principe
Les mesures de concentrations des pigments photosynthétiques sont des paramètres
importants pour l’étude de la production primaire dans les eaux douces et les océans.
La mesure de la concentration en chlorophylle a, ainsi que celle de ses produits de
dégradation, les phéopigments est décrite selon deux méthodes de mesure spectroscopiques
non séparatives : la spectrophotométrie et la fluorimétrie.
Dans notre cas, l'étude de la concentration en chlorophylle a du phytoplancton est effectuée
par la méthode de spectrophotométrie. Pour une mesure précise en laboratoire, la récolte du
matériel en suspension par filtration, suivie d'une extraction du filtre par solvant (acétone à
90%) s’imposent.
L’Appareillage, les réactifs et le mode opératoire sont présentés en (Annexe II).
 Expression des résultats
Il faut corriger les absorbances brutes à 665 et 750nm en soustrayant les blancs des cuves,
puis calculer les absorbances nettes à 665nm avant et après acidification selon :
 Absorbance nette de l'échantillon non acidifié (NA) :
 Absorbance nette de l'échantillon acidifié (A) :
Avec :
: Absorbance nette avant acidification.
: Absorbance nette après acidification.
: Blanc de la cuve à 665nm.
: Blanc de la cuve a 750nm.
 Calcul de la chlorophylle :
Avec :
- V : volume d'eau filtrée (litre) ;
- v : volume de solvant d'extraction (millilitre) ;
-l : longueur du trajet optique de la cuve de mesure (centimètre).
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