Matériels et méthodes
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o Le tube est ensuite bouché et placé dans un réfrigérateur (5°C) pour une période
d'extraction de 30 minutes.
o Après ce délai la fluorescence de l'échantillon est mesurée sur un fluorimètre Turner
designs 10.005R équipé d'un Kit pour la détermination de la chlorophylle a (lampe
F4T4BL, Filtre primaire Corning 5-60, filtre secondaire Corning 2-60).
2. Mesure fluorimétrique
o Mettre en fonction le fluorimètre (environ 1h avant les mesures),
o Régler l’appareil à zéro,
o Rincer plusieurs fois la cuve « Echantillon » avec la pissette Méthanol puis avec un
peu d’échantillon à analyser,
o Pipeter suffisamment de volume pour faire la mesure,
o Mesurer la fluorescence,
o Sortir la cuve et ajouter 100μl de la solution d’acide chlorhydrique 0,3 N,
o Agiter et replacer la cuve, laissé agir pendant 2 min,
o Mesurer la fluorescence à 700 nm,
o Calculer les concentrations.
Calcul des concentrations
La mesure fluorimétrique est effectuée avant acidification. Les concentrations de la
chlorophylle a sont évaluées d’après la formule :
[Chlo a] (µg/L) = F0/K0 * v/VI………………… (3.2)
Ou :
F0 : Valeur de fluorescence
K0 : Le coefficient d'étalonnage établi avec de la chlorophylle a pure (Sigma C5753)
v : Le volume d'extraction (5,2 ml) et V le volume filtré (250 ml).
3.6.4. Sels nutritifs
Une fois le prélèvement d’eau fait, les échantillons ont été conservés au réfrigérateur
pendant deux jours à 4°C. Ensuite l’analyse a été faite par SKALAR.
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o Le tube est ensuite bouché et placé dans un réfrigérateur (5°C) pour une période
d'extraction de 30 minutes.
o Après ce délai la fluorescence de l'échantillon est mesurée sur un fluorimètre Turner
designs 10.005R équipé d'un Kit pour la détermination de la chlorophylle a (lampe
F4T4BL, Filtre primaire Corning 5-60, filtre secondaire Corning 2-60).
2. Mesure fluorimétrique
o Mettre en fonction le fluorimètre (environ 1h avant les mesures),
o Régler l’appareil à zéro,
o Rincer plusieurs fois la cuve « Echantillon » avec la pissette Méthanol puis avec un
peu d’échantillon à analyser,
o Pipeter suffisamment de volume pour faire la mesure,
o Mesurer la fluorescence,
o Sortir la cuve et ajouter 100μl de la solution d’acide chlorhydrique 0,3 N,
o Agiter et replacer la cuve, laissé agir pendant 2 min,
o Mesurer la fluorescence à 700 nm,
o Calculer les concentrations.
Calcul des concentrations
La mesure fluorimétrique est effectuée avant acidification. Les concentrations de la
chlorophylle a sont évaluées d’après la formule :
[Chlo a] (µg/L) = F0/K0 * v/VI………………… (3.2)
Ou :
F0 : Valeur de fluorescence
K0 : Le coefficient d'étalonnage établi avec de la chlorophylle a pure (Sigma C5753)
v : Le volume d'extraction (5,2 ml) et V le volume filtré (250 ml).
3.6.4. Sels nutritifs
Une fois le prélèvement d’eau fait, les échantillons ont été conservés au réfrigérateur
pendant deux jours à 4°C. Ensuite l’analyse a été faite par SKALAR.