CHAPITRE I : MATÉRIEL ET MÉTHODES
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Les cystes une fois séparés des matériaux adhérents denses, se retrouvent toujours mélangés à
d’autres particules légères de densité identique ou inférieure. Ces cystes sont transférés à travers
une série de tamis d’un maillage décroissant, les premiers sont de 500 et 300 micromètres
respectivement, retiennent tout le matériel d’un diamètre supérieur au cyste et enfin à travers un
maillage de 160 micromètres de diamètre, qui permet de retenir les cystes et favorise le passage
du matériel plus fin.
Après ces étapes, les cystes sont pratiquement purifiés. Toujours, il reste un certain pourcentage
de matériel de taille similaire ou inferieure. Pour séparer cette phase, les cystes sont soumis au
processus de flottaison différentielle en eau distillée. Les cystes sont mélangés à l’eau distillée
dans un récipient avec une agitation. Après un laps de temps, la décantation est entamée, les cystes
hydratés se déposent au fond du récipient et les débris de coquilles de cystes et les matériaux légers
flottent en surface de l’eau. Cette étape est généralement réalisée en condition de basse
température, en utilisant de l’eau froide qui permet de ralentir le mécanisme métabolique de
l’embryon. Selon SORGELOOS et al. (1977) le temps de séjour des cystes en eau distillée ne doit
pas dépasser 5 minutes afin d’éviter les effets de l’hydratation.
Une fois que les matériaux adhérents aux cystes sont éliminés, ces derniers sont immédiatement
déshydratés. Cette étape doit se faire le plus rapidement possible, en premier il y a lieu d’éliminer
l’eau à l’aide du papier aspirant, puis ils sont soumis postérieurement à l’action de la chaleur dans
une étuve de séchage à 39ºC.
Quel que soit le degré de purification des cystes, il reste toujours une certaine quantité d’impuretés
composées de matériel détritique et de fibres animales et végétales. Après séchage, les échantillons
de cystes sont conservés à une température inférieure à 4 ºC pour minimiser la possible activation
métabolique.
4. Incubation des cystes (élevage)
La procédure standard utilisée est celle de SORGELOOS et al., (1986) et LAVENS et al. (1996).
Il consiste à incuber 250 mg de cystes dans un récipient en verre conique et cylindrique contenant
100 ml d'eau de mer naturelle filtrée (0,45 à 0,2 μm).
Les cystes doivent être maintenus en suspension en appliquant une aération par le bas, la
température étant maintenue entre 25 et 28 °C, une salinité de 15 à 35 g/l; un pH autour de 8;
une quantité d'oxygène de préférence 5 mg/l; une densité maximale de kystes ne dépassant pas 2
g/l et un éclairage constant de 1000 à 2000 lux (TREECE, 2000).
Dans notre étude un simple dispositif a été réalisé au sein de Centre National de Recherche et de
Développement de la Pèche et de L'Aquaculture (CNRDPA).
Au bout de 25 à 72 heures les nauplius sortent de leurs enveloppes et nagent avec vélocité.
Les cystes n'éclosent pas en même temps.
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Les cystes une fois séparés des matériaux adhérents denses, se retrouvent toujours mélangés à
d’autres particules légères de densité identique ou inférieure. Ces cystes sont transférés à travers
une série de tamis d’un maillage décroissant, les premiers sont de 500 et 300 micromètres
respectivement, retiennent tout le matériel d’un diamètre supérieur au cyste et enfin à travers un
maillage de 160 micromètres de diamètre, qui permet de retenir les cystes et favorise le passage
du matériel plus fin.
Après ces étapes, les cystes sont pratiquement purifiés. Toujours, il reste un certain pourcentage
de matériel de taille similaire ou inferieure. Pour séparer cette phase, les cystes sont soumis au
processus de flottaison différentielle en eau distillée. Les cystes sont mélangés à l’eau distillée
dans un récipient avec une agitation. Après un laps de temps, la décantation est entamée, les cystes
hydratés se déposent au fond du récipient et les débris de coquilles de cystes et les matériaux légers
flottent en surface de l’eau. Cette étape est généralement réalisée en condition de basse
température, en utilisant de l’eau froide qui permet de ralentir le mécanisme métabolique de
l’embryon. Selon SORGELOOS et al. (1977) le temps de séjour des cystes en eau distillée ne doit
pas dépasser 5 minutes afin d’éviter les effets de l’hydratation.
Une fois que les matériaux adhérents aux cystes sont éliminés, ces derniers sont immédiatement
déshydratés. Cette étape doit se faire le plus rapidement possible, en premier il y a lieu d’éliminer
l’eau à l’aide du papier aspirant, puis ils sont soumis postérieurement à l’action de la chaleur dans
une étuve de séchage à 39ºC.
Quel que soit le degré de purification des cystes, il reste toujours une certaine quantité d’impuretés
composées de matériel détritique et de fibres animales et végétales. Après séchage, les échantillons
de cystes sont conservés à une température inférieure à 4 ºC pour minimiser la possible activation
métabolique.
4. Incubation des cystes (élevage)
La procédure standard utilisée est celle de SORGELOOS et al., (1986) et LAVENS et al. (1996).
Il consiste à incuber 250 mg de cystes dans un récipient en verre conique et cylindrique contenant
100 ml d'eau de mer naturelle filtrée (0,45 à 0,2 μm).
Les cystes doivent être maintenus en suspension en appliquant une aération par le bas, la
température étant maintenue entre 25 et 28 °C, une salinité de 15 à 35 g/l; un pH autour de 8;
une quantité d'oxygène de préférence 5 mg/l; une densité maximale de kystes ne dépassant pas 2
g/l et un éclairage constant de 1000 à 2000 lux (TREECE, 2000).
Dans notre étude un simple dispositif a été réalisé au sein de Centre National de Recherche et de
Développement de la Pèche et de L'Aquaculture (CNRDPA).
Au bout de 25 à 72 heures les nauplius sortent de leurs enveloppes et nagent avec vélocité.
Les cystes n'éclosent pas en même temps.