CHAPITRE III
MATERIELS ET METHODES
33
Mesurer l’absorbance à 543 nm en prenant de l’eau distillée comme référence.
Mesurer le blanc de cuve (eau distillée), le blanc des réactifs et le blanc de
l’échantillon (eau de mer).
2.3.3 Dosage del’azote nitrique (NO3 - )
2.3.3.1 Principe de la méthode
La méthode présentée repose sur la colorimétrie du composé de GRIESS obtenu avec
le nitrite après réduction du nitrate en nitrite.
Le principe de base adopté par les analystes marins repose sur la réduction quasi
quantitative (> 95%) du nitrate (NO3
-
) en nitrite (NO2
-
)
Après la réduction, on mesure en réalité la somme des concentrations en nitrate et
nitrite (exprimée NO3+2), La concentration en nitrate obtenue, si nécessaire par soustraction de
la concentration en nitrite, mesurée spécifiquement par ailleurs.
La réduction à l’aide de cadmium est devenue pratique courante depuis la publication
de (WOOD et al ; 1967) in (AMINOT et CHAUSSEPIED, 1983) décrivant le traitement de
l’échantillon sur une colonne de granulés de cadmium traités en cuivre.
2.3.3.2 Réactifs exigés
Réactif 1 : Solution de sulfanilamide.
Réactif 2 : Solution de N- Naphtyl- éthylène diamine.
Solution de chlorure d’ammonium 4,5 mol/l.
Solution d’hydroxyde de sodium à 0.43mol/l.
Solution tampon pH= 8,5.
Remarque : La préparation des réactifs est décrite en ANNEXE II.
2.3.3.3 Etalonnage
Introduire dans des fioles jaugées de 500 ml de 1- 2- 5- 10- 20- 50- 100- 250 ml la
solution de nitrite et compléter avec l’eau distillée afin d’obtenir la gamme de
concentration de 0.1- 0.2- 0.5- 1- 2- 5- 25 µmol/l.
50 ml de la gamme de concentration préparée et ajouter 1 ml de solution concentrée de
chlorure d’ammonium et mélanger.
Analyser à 543 nm les différentes solutions, ainsi que le blanc de réactifs et aussi le
blanc de l’échantillon (eau de mer).
La courbe d’étalonnage établit (Figure III. 13) a pour l’équation : y = 0.0403x.
MATERIELS ET METHODES
33
Mesurer l’absorbance à 543 nm en prenant de l’eau distillée comme référence.
Mesurer le blanc de cuve (eau distillée), le blanc des réactifs et le blanc de
l’échantillon (eau de mer).
2.3.3 Dosage del’azote nitrique (NO3 - )
2.3.3.1 Principe de la méthode
La méthode présentée repose sur la colorimétrie du composé de GRIESS obtenu avec
le nitrite après réduction du nitrate en nitrite.
Le principe de base adopté par les analystes marins repose sur la réduction quasi
quantitative (> 95%) du nitrate (NO3
-
) en nitrite (NO2
-
)
Après la réduction, on mesure en réalité la somme des concentrations en nitrate et
nitrite (exprimée NO3+2), La concentration en nitrate obtenue, si nécessaire par soustraction de
la concentration en nitrite, mesurée spécifiquement par ailleurs.
La réduction à l’aide de cadmium est devenue pratique courante depuis la publication
de (WOOD et al ; 1967) in (AMINOT et CHAUSSEPIED, 1983) décrivant le traitement de
l’échantillon sur une colonne de granulés de cadmium traités en cuivre.
2.3.3.2 Réactifs exigés
Réactif 1 : Solution de sulfanilamide.
Réactif 2 : Solution de N- Naphtyl- éthylène diamine.
Solution de chlorure d’ammonium 4,5 mol/l.
Solution d’hydroxyde de sodium à 0.43mol/l.
Solution tampon pH= 8,5.
Remarque : La préparation des réactifs est décrite en ANNEXE II.
2.3.3.3 Etalonnage
Introduire dans des fioles jaugées de 500 ml de 1- 2- 5- 10- 20- 50- 100- 250 ml la
solution de nitrite et compléter avec l’eau distillée afin d’obtenir la gamme de
concentration de 0.1- 0.2- 0.5- 1- 2- 5- 25 µmol/l.
50 ml de la gamme de concentration préparée et ajouter 1 ml de solution concentrée de
chlorure d’ammonium et mélanger.
Analyser à 543 nm les différentes solutions, ainsi que le blanc de réactifs et aussi le
blanc de l’échantillon (eau de mer).
La courbe d’étalonnage établit (Figure III. 13) a pour l’équation : y = 0.0403x.