Annexe 1
• Technique de préparation d’un milieu de culture
La préparation dite classique d’un milieu de culture s’effectue suivant les démarches suivantes :
• Lire et interpréter la formule de préparation
• Rassembler les différents composants du milieu de culture
• Effectuer la pesée selon le calcul préalable du volume souhaité
• Dissoudre dans de l’eau distillée, ajuster le volume exact
• Répartir le volume final dans des récipients ; flacons stériles
N.B : l’opération de la stérilisation des milieux de culture se fait à l’autoclave 121°C pendant
un quart d’heure, 120°C pendant 20 minutes pour les milieux de culture stérilisables.
2. composition des milieux de culture et réactifs :
Formules indiquées en gramme par litre d’eau distillée
Eau peptonée tamponnée (E.P.T)
Formule :
• Mélange de peptones…………………………………………………… 10,0
• Chlorure de sodium……………………………………………………….5, 0
• Di-sodium hydrogénophosphate……………………………………3,5
• Dihydrogénophosphate de potassium……………………………1,5
Ph final = 7,2 à 25°C
Autoclaver 20 minutes à 120°C
Eau peptonée salée alcaline (E.P.S.A)