Matériels et Méthodes
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4-2- Isolement
4-2-1-Isolement sur milieu solide
La technique est la même que celle pratiquée en bactériologie. Nous avons utilisé des boites
de pétri remplies de gélose et enrichies en milieu de culture (Provasoli et Meyer). Nous avons
étalé ensuite sur la gélose, à l’aide d’une anse de platine, une goutte contenant des cellules
algales. Un premier développement apparait. Nous avons prélevé à nouveau quelques cellules
jeunesà croissance exponentielle que nous avons étalé sur une nouvelle boite de pétri.
L'opération est reproduiteà plusieurs reprisesjusqu'à l'obtention d'un développement d'algue
mono-spécifique qui correspond à la micro-algue recherchée (Chlorella sp et Scendesmus sp).
Cette technique d'isolement est assez longue et laborieuse (Audineau, 1985).
4-2-2-Préparation de milieu gélose et purification des cultures
La préparation de milieu de gélose se fait avec le mélange de milieu de culture et l’agar agar
(100ml de milieu de culture et 2g de l’agar agar), puis nous avons introduit ce mélange dans
l’autoclave pendant 15 minutes à T= 121°C. Ensuite, nous avons laissé refroidir pendant 10
minutes, puis nous avons culé la gélose dans la boite de pétri et nous avons laissé le liquide se
transformer en gélose.
Figure 12 :Remplissage des boites de pétri par la gélose.