Chapitre III
Matériel et méthodes
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Figure III.13 : Chromatographe de marque Clarus 580 (PerkinElmer).
Etalonnage
L’étalonnage du chromatographe consiste à préparer une série des solutions étalons (5
solutions) dont la composition est proche de la solution inconnue, à partir d’une solution mère
de 5000 µg/ ml du cyclohexane (Standard Mixture Stock Solution marque RESTEK).
Préparation du solvant d’extraction
Solution mère du solvant d’extraction
Dissoudre 20 mg de n-tétracontane dans l’hexane, puis ajouter 20µl de n-décane et
diluer avec l’hexane jusqu’à 1000ml, la conserver hermétiquement fermée dans un
réfrigérateur (4°C à 8°C) pendant six mois au maximum.
Solution étalon fille du solvant d’extraction
Diluer la solution mère avec dix fois l’hexane.
Mélanges d’étalonnage
- Étalonner le GC/FID à l’aide des cinq solutions d’étalonnage suivantes: 0.2, 0.4, 0.6,
0.8 et 1.0 mg/ml.
- Pipeter 20, 40, 60, 80et 100μl du mélange étalon dans 5 flacons jaugées de 1 ml
respectivement. Ajuster au trait avec la solution fille du solvant d’extraction.
- Les solutions sont conservées à 4 °C dans des récipients hermétiquement fermés. Les
solutions sont stables 6 semaines.
- Un minimum de trois points d’étalonnage doit être utilisé. À noter que les points
utilisés pour la construction de ces courbes doivent être le plus près de celle-ci. La
courbe d’étalonnage est considérée comme acceptable si le facteur de corrélation est
supérieur ou égal à 0,995.