Chapitre III
Matériel et méthodes
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2.5.3. Purification et fractionnement
Dans cette étape on utilise la chromatographie sur colonne ouverte remplie de l’alumine
neutre (pouvoir de purification) et du gel de silice (pouvoir séparateur et/ou rôle de
fractionnement).
Le gel de silice, et l’alumine servant en chromatographie à colonne ouverte sont
conditionnés comme suite :
- Etape d’activation : une quantité d’adsorbant est pesée et mise à l’étuve à 120°C
pendant 24 heures ;
Etape de désactivation partielle : l'adsorbant est ensuite désactivé partiellement par addition
de 5% d'eau distillée.
La colonne est préparée dans une burette de 50 ml de contenance, de 10 mm de diamètre
interne et muni d’un robinet en téflon qui est remplie de la façon suivante :
- Placer la laine de verre au bas de la burette ;
- Verser 20 ml d’hexane pour conditionner la burette puis laisser couler ;
- Ajouter 5 g du gel de silice mélangé avec l’hexane, laisser décanter en récupérant
l’hexane sans laisser la colonne sécher ;
- Ajouter 5 g d’alumine mélangé avec l’hexane puis laisser décanter en récupérant
l’hexane sans laisser la colonne sécher ;
- Ajouter une pincé de sulfate de sodium anhydre pour éliminer les traces d’eau.
Figure III.11 : Constituant de la chromatographie sur colonne ouverte.