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Figure II.25 : Modèle graphique de la PCR en temps réel où l’intensité de la fluorescence est
exprimée en fonction du nombre de cycles. L’intensité de la fluorescence à chaque cycle est
proportionnelle à la concentration d’amplicons, le cycle seuil (Ct) représente le nombre de
cycles requis où le signal d’émission de fluorescence est statistiquement et significativement
plus élevé que la ligne de base (Poitras et Houde, 2002).
Selon la littérature, la technique la plus fréquemment utilisée jusqu’à maintenant est la
technologie des sondes d’hydrolyse (Taqman assay) bien que sa popularité soit
principalement due à sa maturité commerciale. Cette technologie s’est avérée plus efficace
que celle des agents intercalants au niveau de la spécificité et du multiplex âge (Poitras et
Houde, 2002).
Le développement des technologies de détection à base de balises moléculaires amène encore
davantage de spécificité et de précision entre autre pour la détection des SNPs et des analyses
de génotypage comparativement aux technologies basées sur les sondes linaires. La PCR en
temps réel s’avère très intéressante pour des applications d’analyses à grande échelle étant
donné que le processus complet est automatisé du début à la fin (Poitras et Houde, 2002).
Application PCR en temps réel
La technique de PCR en temps réel a été utilisée pour l’identification des espèces de
crevettes dans les produits de la mer transformés et conditionnés en Tunisie en 2015.
Une quantification efficace de l’ADN est effectuée grâce à la méthode par PCR en temps-réel
(Juste et al.2008) qui est basée sur la détection et la quantification d’une molécule
Figure II.25 : Modèle graphique de la PCR en temps réel où l’intensité de la fluorescence est
exprimée en fonction du nombre de cycles. L’intensité de la fluorescence à chaque cycle est
proportionnelle à la concentration d’amplicons, le cycle seuil (Ct) représente le nombre de
cycles requis où le signal d’émission de fluorescence est statistiquement et significativement
plus élevé que la ligne de base (Poitras et Houde, 2002).
Selon la littérature, la technique la plus fréquemment utilisée jusqu’à maintenant est la
technologie des sondes d’hydrolyse (Taqman assay) bien que sa popularité soit
principalement due à sa maturité commerciale. Cette technologie s’est avérée plus efficace
que celle des agents intercalants au niveau de la spécificité et du multiplex âge (Poitras et
Houde, 2002).
Le développement des technologies de détection à base de balises moléculaires amène encore
davantage de spécificité et de précision entre autre pour la détection des SNPs et des analyses
de génotypage comparativement aux technologies basées sur les sondes linaires. La PCR en
temps réel s’avère très intéressante pour des applications d’analyses à grande échelle étant
donné que le processus complet est automatisé du début à la fin (Poitras et Houde, 2002).
Application PCR en temps réel
La technique de PCR en temps réel a été utilisée pour l’identification des espèces de
crevettes dans les produits de la mer transformés et conditionnés en Tunisie en 2015.
Une quantification efficace de l’ADN est effectuée grâce à la méthode par PCR en temps-réel
(Juste et al.2008) qui est basée sur la détection et la quantification d’une molécule