Matériel et méthodes
45
Préparation de la suspension bactérienne
Elle est réalisée dans une solution saline stérile de 0.9% de NaCl avec une turbidité de 0.5 de la
gamme de Mc Farland ce qui correspond à un inoculum d‟environ 1 à 2*10
8
UFC/ml (l‟absorbance à
625 nm doit être comprise entre 0.08 et 0.13).
Détermination de l‟activité antibactéienne
-1 ml d‟eau distillée stérile est ajouté à 0.5 g de l‟extrait sec de la spiruline, on obtient un extrait
aqueux qu‟on filtre à l‟aide d‟un filtre seringue à 0.22 µm.
-Prélever 1ml du filtrat et le mettre dans 8 tubes préalablement remplis avec 1ml d‟eau distillée
stérile allant de 10ˉ
1
, 10ˉ
2
, 10ˉ
3 , 10ˉ
4 , 10
-5 , 10
-6 , 10
-7 et 10
-8. .
-Imbiber les disques stériles de papier Wattman de 8 mm de diamètre avec 15µl de l‟extrait
aqueux et les déposer sur la surface des boites de pétri contenant les souches bactériennes
ensemencées.
-Incuber les boites à 37°C pendant 24 heures. (CHAKRABORTY et al., 2015).
Expression des résultats
Les résultats obtenus seront exprimés en diamètre de zones d‟inhibition produites autour des
disques (CHAKRABORTY et al., 2015).
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Préparation de la suspension bactérienne
Elle est réalisée dans une solution saline stérile de 0.9% de NaCl avec une turbidité de 0.5 de la
gamme de Mc Farland ce qui correspond à un inoculum d‟environ 1 à 2*10
8
UFC/ml (l‟absorbance à
625 nm doit être comprise entre 0.08 et 0.13).
Détermination de l‟activité antibactéienne
-1 ml d‟eau distillée stérile est ajouté à 0.5 g de l‟extrait sec de la spiruline, on obtient un extrait
aqueux qu‟on filtre à l‟aide d‟un filtre seringue à 0.22 µm.
-Prélever 1ml du filtrat et le mettre dans 8 tubes préalablement remplis avec 1ml d‟eau distillée
stérile allant de 10ˉ
1
, 10ˉ
2
, 10ˉ
3 , 10ˉ
4 , 10
-5 , 10
-6 , 10
-7 et 10
-8. .
-Imbiber les disques stériles de papier Wattman de 8 mm de diamètre avec 15µl de l‟extrait
aqueux et les déposer sur la surface des boites de pétri contenant les souches bactériennes
ensemencées.
-Incuber les boites à 37°C pendant 24 heures. (CHAKRABORTY et al., 2015).
Expression des résultats
Les résultats obtenus seront exprimés en diamètre de zones d‟inhibition produites autour des
disques (CHAKRABORTY et al., 2015).
