Matériel et méthodes
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Expression des résultats
Le rapport frontal est calculé comme suit :
Avec : 0 ≤ RF ≥ 1.
Si RF = 0 : la substance reste au point de départ (pas d‟affinité pour le solvant).
Si RF = 1 : la substance est totalement entrainée par le solvant jusqu‟au front.
V. Evaluation de la qualité microbienne de la spiruline
Les analyses microbiologiques ont été effectuées au niveau du laboratoire de biologie cellulaire et
moléculaire 1 (LBCM1) de l‟ENSSMAL.
Pour la préparation de la suspension mère, nous avons préparé de façon aseptique, une solution
ayant une dilution de 1/10 (1 g d‟échantillon auquel 9 ml d‟eau physiologique stérile ont été
ajoutés). Différentes dilutions décimales sont retenues (10
-1 , 10
-2 , 10
-3 , 10
-4 , 10
-5 et 10
-6 ) pour les
analyses.
V.1. Dénombrement de la flore mésophile aérobie totale (FMAT) selon la norme NF V08051 (Anonyme, 1992 in AOUIR, 2017)
Pour cela, on transfère 0,1 ml des différentes dilutions décimales retenues (10
-1 , 10
-2 , 10
-3 , 10
-4 ,
10
-5 et 10
-6 ) dans les boîtes de pétri de diamètre de 90 mm, on rajoute 15 ml environ du milieu Plate
Count Agar (PCA). Après solidification, une deuxième couche de gélose est déposée en surface. On
incube les boîtes de Pétri à 30 °C pendant 72 heures. Seules les colonies blanchâtres situées entre les
2 couches de PCA sont prises en compte. On retient pour le dénombrement, les boîtes de Pétri
contenant un nombre compris entre 30 et 300 colonies.
V.2. Dénombrement de la flore fongique (FF)
Il concerne les levures et les moisissures. Le milieu utilisé pour le dénombrement des levures et
des moisissures est Sabouraud Chloramphenicol (en annexe tableau 3). Le milieu est coulé et
refroidi dans des boîtes de Pétri. 0,1 ml des dilutions sont étalés à la surface de la gélose. Après 5
jours d‟incubation à 25 °C, on retient les boîtes contenant moins de 150 colonies.
V.3. Dénombrement des coliformes totaux (CT)
Le milieu désoxycholate lactose agar (1%) a été utilisé. 1 ml d‟une dilution est prélevé et
ensemencé dans la gélose en surfusion. Les incubations sont faites à 30 ºC et les lectures après
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Expression des résultats
Le rapport frontal est calculé comme suit :
Avec : 0 ≤ RF ≥ 1.
Si RF = 0 : la substance reste au point de départ (pas d‟affinité pour le solvant).
Si RF = 1 : la substance est totalement entrainée par le solvant jusqu‟au front.
V. Evaluation de la qualité microbienne de la spiruline
Les analyses microbiologiques ont été effectuées au niveau du laboratoire de biologie cellulaire et
moléculaire 1 (LBCM1) de l‟ENSSMAL.
Pour la préparation de la suspension mère, nous avons préparé de façon aseptique, une solution
ayant une dilution de 1/10 (1 g d‟échantillon auquel 9 ml d‟eau physiologique stérile ont été
ajoutés). Différentes dilutions décimales sont retenues (10
-1 , 10
-2 , 10
-3 , 10
-4 , 10
-5 et 10
-6 ) pour les
analyses.
V.1. Dénombrement de la flore mésophile aérobie totale (FMAT) selon la norme NF V08051 (Anonyme, 1992 in AOUIR, 2017)
Pour cela, on transfère 0,1 ml des différentes dilutions décimales retenues (10
-1 , 10
-2 , 10
-3 , 10
-4 ,
10
-5 et 10
-6 ) dans les boîtes de pétri de diamètre de 90 mm, on rajoute 15 ml environ du milieu Plate
Count Agar (PCA). Après solidification, une deuxième couche de gélose est déposée en surface. On
incube les boîtes de Pétri à 30 °C pendant 72 heures. Seules les colonies blanchâtres situées entre les
2 couches de PCA sont prises en compte. On retient pour le dénombrement, les boîtes de Pétri
contenant un nombre compris entre 30 et 300 colonies.
V.2. Dénombrement de la flore fongique (FF)
Il concerne les levures et les moisissures. Le milieu utilisé pour le dénombrement des levures et
des moisissures est Sabouraud Chloramphenicol (en annexe tableau 3). Le milieu est coulé et
refroidi dans des boîtes de Pétri. 0,1 ml des dilutions sont étalés à la surface de la gélose. Après 5
jours d‟incubation à 25 °C, on retient les boîtes contenant moins de 150 colonies.
V.3. Dénombrement des coliformes totaux (CT)
Le milieu désoxycholate lactose agar (1%) a été utilisé. 1 ml d‟une dilution est prélevé et
ensemencé dans la gélose en surfusion. Les incubations sont faites à 30 ºC et les lectures après