Matériel et méthodes
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3.3.4. Recherche et dénombrement des Streptocoques fécaux
➢ Principe :
Les streptocoques fécaux sont recherchés et dénombrés en milieu liquide par la technique du
NPP. La technique fait appel à deux tests consécutifs à savoir :
• Test de résomption : réservé à la recherche des streptocoques sur milieu Rothe.
• Test de confirmation : réservé à la confirmation proprement dite sur milieu EvaLitsky, des tubes trouvés positifs au niveau de test de présomption.
• Test présomptif :
▪ Mode opératoire :
- Préparer dans un portoir une série de tubes contenant le milieu Rothe à raison de
trois tubes par dilution.
- A partir des dilutions décimales 10
-1 à 10
-3 , porter aseptiquement 1 ml dans
chacun des trois tubes correspondant à une dilution donnée. Bien mélanger le
milieu et l’inoculum.
- Incuber 37°C pendant 24 à 48 heures.
▪ Lecture : Sont considérés positifs les tubes présentant : un trouble microbien.
• Test confirmatif :
▪ Mode opératoire :
Chaque tube de Rothe positif lors du test de présomption fera l’objet d’un repiquage dans un
tube de milieu d’Eva Litsky. Bien mélanger le milieu et l’inoculum et incuber à 37°C pendant
24 heures.
▪ Lecture : Sont considérés positifs les tubes présentant à la fois :
o Un trouble microbien.
o Une pastille blanchâtre ou violette au fond du tube.
La lecture finale s’effectue également selon les prescriptions de la table de Mac Grady en tenant compte
uniquement les tubes positifs ou négatifs d’Eva Litsky.