Chapitre III
Matériels et méthode
32
Cette mesure consiste à calciner les filtres déjà utilisées pour la mesure de la concentration
des matières en suspension. La teneur en matière organique particulaire est obtenue par la
différence de poids des filtres avant et après calcination. (Aminot & Chaussepied, 1983).
Les sels nutritifs :
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (Nitrite, Nitrate, phosphate, Silicate) est
basée sur une réaction de coloration à flux continu sur une chaine automatisée « Auto
Analyser San Plus » S.F.A.S (Figure 53) (annexe II) selon le protocole décrit par le
constructeur SKALAR (Annexe III).
Le phytoplancton :
Les analyses phytoplanctoniques ont été effectuées au laboratoire par la méthode classique
d’Utermöhl (1958).
Le comptage du phytoplancton a été fait sur toute la cuve, et les identifications des espèces
phytoplanctoniques ont été faites avec un microscope inversé, après sa sédimentation, la
détermination des espèces a été réalisée en utilisant les ouvrages suivants : Boni & al (2005) ;
Carmelo & Tomas (1997) ; Ricard (1987) ; Kazumis & Yasuwo (2000) ; Cupp (1977) ;
Peraguallo (1965) ; Nezan & al (1997).
Analyse Bactériologique :
Les analyses bactériologiques ont été effectuées par la technique de filtration sur membrane
qui consiste à recueillir, sur une membrane stérile un volume donné de produit à analyser, la
membrane est ensuite déposée sur un milieu nutritif convenable ; après incubation, les
colonies sont dénombrer et identifier.
Pour les coliformes totaux et les coliformes fécaux, la membrane est déposée sur un milieu
gélosé approprié. Ceci permet aux colonies de coliformes de se développer préférentiellement
au cours d’une incubation durant 24 à 48 h pour la recherche des coliformes totaux à 37°C et
à 44°C pour les coliformes fécaux. (Rejsek, 2002).
Pour les streptocoques fécaux, deux tests sont effectués. Le premier est présomptif et réalisé
sur le milieu de Slanetz et Bartley. Le second est confirmatif et réalisé sur gélose
BEA. (Rejsek, 2002).
Le matériel utilisé et la méthode de mesure suivie pour chaque type d’analyse sont résumés
dans le Tableau 8. Les protocoles sont détaillés en Annexe III.
Matériels et méthode
32
Cette mesure consiste à calciner les filtres déjà utilisées pour la mesure de la concentration
des matières en suspension. La teneur en matière organique particulaire est obtenue par la
différence de poids des filtres avant et après calcination. (Aminot & Chaussepied, 1983).
Les sels nutritifs :
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (Nitrite, Nitrate, phosphate, Silicate) est
basée sur une réaction de coloration à flux continu sur une chaine automatisée « Auto
Analyser San Plus » S.F.A.S (Figure 53) (annexe II) selon le protocole décrit par le
constructeur SKALAR (Annexe III).
Le phytoplancton :
Les analyses phytoplanctoniques ont été effectuées au laboratoire par la méthode classique
d’Utermöhl (1958).
Le comptage du phytoplancton a été fait sur toute la cuve, et les identifications des espèces
phytoplanctoniques ont été faites avec un microscope inversé, après sa sédimentation, la
détermination des espèces a été réalisée en utilisant les ouvrages suivants : Boni & al (2005) ;
Carmelo & Tomas (1997) ; Ricard (1987) ; Kazumis & Yasuwo (2000) ; Cupp (1977) ;
Peraguallo (1965) ; Nezan & al (1997).
Analyse Bactériologique :
Les analyses bactériologiques ont été effectuées par la technique de filtration sur membrane
qui consiste à recueillir, sur une membrane stérile un volume donné de produit à analyser, la
membrane est ensuite déposée sur un milieu nutritif convenable ; après incubation, les
colonies sont dénombrer et identifier.
Pour les coliformes totaux et les coliformes fécaux, la membrane est déposée sur un milieu
gélosé approprié. Ceci permet aux colonies de coliformes de se développer préférentiellement
au cours d’une incubation durant 24 à 48 h pour la recherche des coliformes totaux à 37°C et
à 44°C pour les coliformes fécaux. (Rejsek, 2002).
Pour les streptocoques fécaux, deux tests sont effectués. Le premier est présomptif et réalisé
sur le milieu de Slanetz et Bartley. Le second est confirmatif et réalisé sur gélose
BEA. (Rejsek, 2002).
Le matériel utilisé et la méthode de mesure suivie pour chaque type d’analyse sont résumés
dans le Tableau 8. Les protocoles sont détaillés en Annexe III.