Chapitre II: matériel et méthodes
40
4.3.2. Dénombrement et recherche de la flore contenue dans le biote
Notre étude consiste à l’analyse bactériologique des moules et des huîtres afin de
comparer les résultats avec ceux obtenus pour les eaux de surface dans lesquelles ils
se trouvent naturellement. Les différentes étapes de préparation de la suspension mère
et des dilutions sont illustrées dans la Figure II.14.
Figure II.14. Technique de préparation des dilutions
4.3.2.1. Recherche et dénombrement des coliformes par incorporation en
milieu gélosé
A l’aide d’une micro pipette, mettre1 ml de chaque dilution sur le fond d’une petite
boite de Pétri, répéter l’opération deux fois pour chaque dilution, Numéroter
successivement, couler sur la gélose de désoxycholate 1‰ fondue puis refroidie à
45°C. Bien homogénéiser l’inoculum et la gélose en faisant des mouvements
circulaires et de va et vient en forme de « 8 » et laisser solidifier. Incuber les boites
pendant 24 - 48 heures à 37°C pour les coliformes totaux et à 44°C pour les
thermotolérants. (Tableau II.2)

Lecture
Le dénombrement des coliformes se fait par comptage des colonies roses sous formes
lenticulaire.
Evaluation du nombre de CT
Retenir les boites de deux dilutions successives donnant un nombre compris entre 15
et 150 colonies.
25g de chair
du moules/
huîtres+ 225
ml d’EPT
10-1
1 ml
D 10
−2
+
9ml
d’EDS
1 ml
D 10
−3
+
9 ml
d’EDS
1ml
D 10
−4
+
9ml
d’EDS