Figure AIII.4. Courbe d’étalonnage pour le phosphate
Annexe V
Dosage de la chlorophylle a par spectrométrie
a. Principe de la méthode de dosage
La mesure des pigments phytoplanctoniques repose sur leurs caractéristiques
spectroscopiques : absorption de lumière (spectrophotométrie). Contenue dans les
cellules, la chlorophylle a est un paramètre « particulaire » qui, pour une mesure
précise en laboratoire, nécessite la récolte du matériel en suspension par filtration,
suivie d'une extraction du filtre par solvant.
Lorsque l'on analyse les pigments, on doit toujours garder à l'esprit qu'ils sont
photosensibles, et que protection contre la lumière excessive doit être une
préoccupation permanente à toutes les étapes du protocole analytique, avec stockage à
l'abri de la lumière entre les étapes.
Les chlorophylles (a, b et c) présentent deux bandes de forte absorption lumineuse,
l'une dans le bleu (< 460 nm), l'autre dans le rouge (630- 670 nm). Comme les
caroténoïdes, coextraits avec les chlorophylles,177Hydrologie des écosystèmes
marins. Paramètres et analyses absorbent eux aussi intensément dans le bleu, les
mesures spectrophotométriques sont limitées aux bandes d'absorption dans le rouge.