CHAPITRE II : MATÉRIELS ET MÉTHODES
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2-Préparation de l’inoculum :
Il faut préalablement avoir développé une bactérie en colonies isolées dans une boîte de
Pétri.
- Ouvrir une ampoule de « Suspension Medium » ou introduire quelques ml d’eau
distillée stérile (avec une pipette Pasteur) dans un tube à vis stérile.
- Avec la pipette Pasteur, prélever une seule colonie bien isolée sur milieu gélosé.
- Réaliser une suspension bactérienne en homogénéisant soigneusement les
bactéries.
- Incuber à l’étuve de 37°C pendant 24h/48h.
3-Inoculation de la galerie API 20 E :
- Avec la suspension bactérienne et la pipette ayant servi au prélèvement, remplir
tubes et cupules des tests.
- Remplir uniquement les tubes CIT, VP, Gel (et non les cupules) des autres tests.
- Créer une anaérobiose dans les tests ADH, LDC, ODC, H2S, URE en
remplissant leurs cupules d’huile de paraffine.
- Refermer la boîte d’incubation et la placer dans l’étuve à 35 - 37°C pendant 24 à
48h.
Figure.26. Schéma de la galerie API 20 E.
4-Lecture et identification :
- Après incubation, la lecture de la galerie doit se faire en se référant au catalogue
de lecture (Annexe / Tableau V).
- Réaliser les tests nécessitant l’addition de réactifs.