CHAPITRE II : MATÉRIELS ET MÉTHODES
43
d) Test d’urée indole :
Sert à l'identification des germes, particulièrement des entérobactéries, par la recherche
d'une enzyme appelée uréase ce qui provoque une réaction acidifiant le milieu qui fait virer
l'indicateur coloré. C’est un milieu utilisé comme test biochimique lors de l’identification des
entérobactéries (JOFFIN & LEYRAL, 2001).
 Mode opératoire :
Prendre un inoculum de la solution bactérienne est le mettre dans le bouillon, puis
incuber à 37°C pendant 24h.
 Lecture :
Figure.24. Test urée indole.
Ce milieu sert à voir si:
- La bactérie consomme l'urée, donc la bactérie produit l'indole.
- La bactérie consomme l'urée, ça va produire des bases qui vont à leur tour
changer la couleur de l'indicateur coloré de pH au rose pétant. Sinon, ça ne va pas
changer de couleur.
e) Le Mannitol-Mobilité Nitrate / Gélose :
C’est un milieu utilisé lors de l’identification biochimique des entérobactéries et des
coliformes. Le principe du milieu repose sur l’aptitude de certaines entérobactéries à
fermenter le mannitol (virage au jaune) et à éventuellement réduire les nitrates en nitrites
(SINGLETON & SAINSBURY, 1984).
 Mode opératoire :
- Faire un pique avec pipette pasteur et mettre les colonies bactriennes, puis
incuber à 37°C pendant 24h.
- Ajouter les réactifs nitrites 1 et Nitrites 2 et observer le virage de couleur.