CHAPITRE II : MATÉRIELS ET MÉTHODES
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 Lecture :
-
Apparition d’une tache violette au bout de 30 secondes, donc la bactérie
possède le cytochrome oxydase (oxydase positif).
-
Autre couleur, la bactérie est (oxydase négatif).
b) Test Triple Sugar Iron :
La gélose TSI permet l’identification des entérobactéries (Salmonelle) par la mise en
évidence rapide de la fermentation du lactose, du glucose (avec ou sans production de gaz),
du saccharose et de la production de sulfure d’hydrogène (LEON & MICHEL, 2007).
 Technique :
A partir d’une colonie suspecte prélevée sur un milieu d’isolement sélectif, ensemencer
le culot par piqûre centrale et la surface inclinée par des stries serrées. Incuber à 37°C pendant
18-24 heures.
 Lecture :
L’utilisation de l’un des sucres contenus dans le milieu se traduit par une acidification
(virage au jaune du rouge de phénol). Une alcalinisation se révèle par une coloration rouge
foncé. La production de sulfure d’hydrogène à partir du thiosulfate est mise en évidence par
la formation d'un précipité noir. La gélose TSI fournit quatre renseignements principaux
expliqués par la figure ci-dessous :
Figure.22. Les renseignements principaux de la gélose TSI.
1-Fermentation de glucose :

Culot rouge : glucose non fermenté.

Culot jaune : glucose fermenté.
2-Fermentation du lactose et/ou du saccharose :

Pente inclinée rouge : lactose et saccharose non fermentés.

Pente inclinée jaune : lactose et/ou saccharose fermentés.
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