Les ondes lumineuses 281
un photon est inversement proportionnelle à la longueur d'onde
de la lumière. L' absorption d'une énergie lumineuse dépend de la
structure électronique de la molécule, l'absorption ayant pour effet
de promouvoir des électrons vers des orbitales antiliantes inoccupées. Ladite absorption de lumière doit correspondre, du point de
vue énergétique, à ce qui est exactement nécessaire pour qu'un
électron saute d'une orbitale liante ou non liante vers une orbitale
antiliante. Les molécules qui possèdent des doubles liaisons conjuguées présentent une barrière énergétique plus basse pour qu'un
électron saute vers une orbitale antiliante. De tels composés absorberont donc une lumière de plus grande longueur d'onde. Il existe
une loi, dite de Beer-Lambert, qui établit une relation entre l'absorption lumineuse et la concentration, de sorte qu'il est possible
d'estimer quantitativement la concentration d'une molécule en
solution, directement ou par colorimétrie. L'absorption lumineuse
se mesure à l'aide d'un spectrophotomètre. La lumière absorbée
peut se dissiper selon un processus non radiatif, par transfert en
résonance de l'énergie, par la réalisation d'une réaction chimique
ou encore par fluorescence.
Ouvrages de référence
Freifelder, D. (1982), Physical Biochemistry-Applications to Biochemistry and
Mo lecular Biology, chapitres 14 et 15, W. H. Freeman, San Francisco.
Harris, D.A. et Bashford, C.L. (1985), Sp ectrophotometry and Sp �ctrojluorimetry-A Practical Approach, IRL Press, Oxford.
Holme, D.J. et Peck, H. (1998), Analytical Biochemistry, chapitre 2, Longman,
Chicago, New York.
Questions d'auto-évaluation
Question 17 .7 Trois composés sont présentés dans la figure 17.16.
Lequel, selon vous, est censé absorber à la plus grande
longueur d'onde et lequel à la plus petite.
(a)
(b)
(c)
Figure 17.1 6 Trois molécules contenant des doubles liaisons.
Question 17 .8 Une solution 0,3 M d'une molécule particulière donne
lieu à une absorbance de 0,3 à 475 nm. Le trajet optique
de la cuvette est de 1 cm. Calculer le coefficient d'extinction molaire de cette molécule à 475 nm.
Question 17 .9 Décrire le rôle exercé par les parties suivantes d'un spectrophotomètre à simple faisceau : (a) prisme réflecteur,
(b) cellule photoélectrique et (c) fente variable.
'f
un photon est inversement proportionnelle à la longueur d'onde
de la lumière. L' absorption d'une énergie lumineuse dépend de la
structure électronique de la molécule, l'absorption ayant pour effet
de promouvoir des électrons vers des orbitales antiliantes inoccupées. Ladite absorption de lumière doit correspondre, du point de
vue énergétique, à ce qui est exactement nécessaire pour qu'un
électron saute d'une orbitale liante ou non liante vers une orbitale
antiliante. Les molécules qui possèdent des doubles liaisons conjuguées présentent une barrière énergétique plus basse pour qu'un
électron saute vers une orbitale antiliante. De tels composés absorberont donc une lumière de plus grande longueur d'onde. Il existe
une loi, dite de Beer-Lambert, qui établit une relation entre l'absorption lumineuse et la concentration, de sorte qu'il est possible
d'estimer quantitativement la concentration d'une molécule en
solution, directement ou par colorimétrie. L'absorption lumineuse
se mesure à l'aide d'un spectrophotomètre. La lumière absorbée
peut se dissiper selon un processus non radiatif, par transfert en
résonance de l'énergie, par la réalisation d'une réaction chimique
ou encore par fluorescence.
Ouvrages de référence
Freifelder, D. (1982), Physical Biochemistry-Applications to Biochemistry and
Mo lecular Biology, chapitres 14 et 15, W. H. Freeman, San Francisco.
Harris, D.A. et Bashford, C.L. (1985), Sp ectrophotometry and Sp �ctrojluorimetry-A Practical Approach, IRL Press, Oxford.
Holme, D.J. et Peck, H. (1998), Analytical Biochemistry, chapitre 2, Longman,
Chicago, New York.
Questions d'auto-évaluation
Question 17 .7 Trois composés sont présentés dans la figure 17.16.
Lequel, selon vous, est censé absorber à la plus grande
longueur d'onde et lequel à la plus petite.
(a)
(b)
(c)
Figure 17.1 6 Trois molécules contenant des doubles liaisons.
Question 17 .8 Une solution 0,3 M d'une molécule particulière donne
lieu à une absorbance de 0,3 à 475 nm. Le trajet optique
de la cuvette est de 1 cm. Calculer le coefficient d'extinction molaire de cette molécule à 475 nm.
Question 17 .9 Décrire le rôle exercé par les parties suivantes d'un spectrophotomètre à simple faisceau : (a) prisme réflecteur,
(b) cellule photoélectrique et (c) fente variable.
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