Chapitre II : Matériel et méthodes
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papier pH a été ensuite comparée à l’échelle de teinte qui donne les différentes valeurs de pH
(Figure 18).
Figure 18 : Détermination du pH .
3.5.3 Caractéristiques microscopiques
3.5.3.1 Concentration
Cette mesure consiste à déterminer le nombre de spermatozoïdes par millilitre de
semence pure à l’aide de la cellule de Thoma ayant deux grilles. Chaque grille est divisée en 16
grands carrés, eux-mêmes divisés en 16 petits carrés.
Fixation du sperme
La fixation se fait suite :
Nous prenons 1 microlitres de sperme à l’aide d’une micropipette après nous ajoutons
199 microlitres de formol dilué à 10%.
La semence diluée est homogénéisée à l’aide d’un agitateur (Vortex) avant de
manipuler.
Méthode d’estimation de concentration
- Pour préparer la cellule de Thoma (A), il faut d’abord la positionner sur une surface
plane, puis appliquer soigneusement de l’adhésif sur les bords de la lamelle, la faire
glisser doucement sur toute la largeur de la cellule et s’assurer qu’elle adhère solidement
(cellule-lamelle) (B).
- Faire une dilution de 1/200 pour le sperme, homogénéiser le sperme dilué à l’aide de
vortex (C).
- À l’aide d’une micropipette, extrayez une goutte de semence diluée(D) et positionner la
soigneusement. En bordure de lamelle pour la première et deuxième grille. Par action
capillaire, la gouttelette se dispersera progressivement entre la lame et la lamelle (E).
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papier pH a été ensuite comparée à l’échelle de teinte qui donne les différentes valeurs de pH
(Figure 18).
Figure 18 : Détermination du pH .
3.5.3 Caractéristiques microscopiques
3.5.3.1 Concentration
Cette mesure consiste à déterminer le nombre de spermatozoïdes par millilitre de
semence pure à l’aide de la cellule de Thoma ayant deux grilles. Chaque grille est divisée en 16
grands carrés, eux-mêmes divisés en 16 petits carrés.
Fixation du sperme
La fixation se fait suite :
Nous prenons 1 microlitres de sperme à l’aide d’une micropipette après nous ajoutons
199 microlitres de formol dilué à 10%.
La semence diluée est homogénéisée à l’aide d’un agitateur (Vortex) avant de
manipuler.
Méthode d’estimation de concentration
- Pour préparer la cellule de Thoma (A), il faut d’abord la positionner sur une surface
plane, puis appliquer soigneusement de l’adhésif sur les bords de la lamelle, la faire
glisser doucement sur toute la largeur de la cellule et s’assurer qu’elle adhère solidement
(cellule-lamelle) (B).
- Faire une dilution de 1/200 pour le sperme, homogénéiser le sperme dilué à l’aide de
vortex (C).
- À l’aide d’une micropipette, extrayez une goutte de semence diluée(D) et positionner la
soigneusement. En bordure de lamelle pour la première et deuxième grille. Par action
capillaire, la gouttelette se dispersera progressivement entre la lame et la lamelle (E).