Chapitre II : Matériel et méthodes
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3. Méthode
3.1 Préparation des dilueurs
Au but d’optimisation de la conservation de sperme de tilapia nous avons utilisé un
milieu qui a été utilisé pour la conservation de sperme de poissons. Composé de10 g de glucose,
0,75 g de KCl, 7,5 ml de Tris (pH : 8, 0) et 10% de méthanol pour un volume final de 250 ml
(Gambakpo, 2021).
Pour préparer cette solution il faut :
Etape 1 : Peser 10 g de glucose et 0,75 g de KCl, pour cela :
- Tarer la balance avec le papier aluminium vide.
- Avec la spatule déposer le glucose jusqu'à ce que la balance affiche 10 g.
- Répéter la même étape pour le KCl.
Etape 2 :
- Introduire les 10 g glucose dans la fiole jaugée de 250 ml à l’aide de l’entonnoir.
- Rincer l’entonnoir à l’eau distillée afin de récupérer tous les grains de glucose.
- répéter la même étape pour le KCl.
Etape 3 :
A l’aide des pipettes graduées et pipetteur, Ajouter 7,5 ml de tris et 25 ml de méthanol
Etape 4 :
- Ajouter de l’eau distillée jusqu'à environ ¾ de la fiole.
- Boucher la fiole et secouer pour homogénéiser la solution.
Etape 5 :
Remplir précisément à l’eau distillée jusqu’au trait de jauge.
Etape 6 :
- Mettre le barreau magnétique à l’intérieur de la fiole.
- Boucher la fiole et mettre sur l’agitateur pour homogénéiser la solution.