Chapitre I : Généralités
21
Antibiotiques : Pour empêcher la croissance bactérienne, des antibiotiques comme la
pénicilline ou la streptomycine sont couramment introduits, comme cité par Lusignan
(2011). Il convient toutefois de noter que ces antibiotiques peuvent avoir un impact
néfaste sur les spermatozoïdes, car ils entravent la prolifération des bactéries présentes
dans la plupart des éjaculats (Althouse, 2000).
Solution tampon : Afin d’assurer la survie des spermatozoïdes, il est nécessaire de
maintenir un pH extracellulaire optimal et une osmolarité appropriée. Pour y parvenir,
des tampons tels que le phosphate, le Tris ou le citrate de sodium sont couramment
utilisés (Vishwanath et Shannon, 2000). Tris est un tampon largement utilisé dans les
applications biologiques pour la formulation de solutions tampons (Giusti et al., 2002).
Agents protecteurs : Pour améliorer la fluidité cellulaire et diminuer la formation de
cristaux de glace intracellulaires, des agents cryoprotecteurs doivent pénétrer dans la
membrane cellulaire et induire une déshydratation partielle. Ce processus abaisse
efficacement le point de congélation, ce qui entraîne une réduction de l'engourdissement
et une taille plus petite des cristaux de glace (Rosato et Laffaldano, 2013). Ces agents
peuvent être classés en deux groupes principaux.
Agents perméables : Le cryoprotecteur le plus utilisé dans le monde est le glycérol. Il
possède la capacité d’agir à la fois à l’intérieur et à l’extérieur des cellules. Le glycérol
pénètre dans les spermatozoïdes et modifie la structure des cristaux de glace qui se
développent, ce qui donne une forme plus sphérique. Cette modification diminue le
risque de perforation de la membrane, comme l'ont indiqué Stănescu et Alin en 2010.
Découvert par Loverlok et Bishop en 1959, le diméthylsulfoxyde (DMSO) est un
cryoprotecteur intracellulaire qui présente une pénétration rapide, réduisant ainsi la période
d'équilibre (Billard et Legendre, 1980).
Des études ont démontré que l'éthylène glycol (EG) possède des propriétés
cryoprotectrices (Ana et al., 2006). L'amélioration de la qualité du sperme, y compris la
viabilité, l'intégrité des acrosomes et des membranes, ainsi qu'une réduction des anomalies de
l'expression de la mobilité, ont été observées avec l'utilisation d'éthylène glycol, comme l'ont
rapporté Swelum et al. en 2011.
Agents non perméables
Le jaune d'œuf, que l'on retrouve dans les agents de congélation du sperme de lapin, est
généralement utilisé à des concentrations allant de 10 à 20 % (Mocé et Vicente, 2009). Le lait
écrémé, en particulier la version sans lipides, sert d'agent protecteur à la fois pour le sperme et
21
Antibiotiques : Pour empêcher la croissance bactérienne, des antibiotiques comme la
pénicilline ou la streptomycine sont couramment introduits, comme cité par Lusignan
(2011). Il convient toutefois de noter que ces antibiotiques peuvent avoir un impact
néfaste sur les spermatozoïdes, car ils entravent la prolifération des bactéries présentes
dans la plupart des éjaculats (Althouse, 2000).
Solution tampon : Afin d’assurer la survie des spermatozoïdes, il est nécessaire de
maintenir un pH extracellulaire optimal et une osmolarité appropriée. Pour y parvenir,
des tampons tels que le phosphate, le Tris ou le citrate de sodium sont couramment
utilisés (Vishwanath et Shannon, 2000). Tris est un tampon largement utilisé dans les
applications biologiques pour la formulation de solutions tampons (Giusti et al., 2002).
Agents protecteurs : Pour améliorer la fluidité cellulaire et diminuer la formation de
cristaux de glace intracellulaires, des agents cryoprotecteurs doivent pénétrer dans la
membrane cellulaire et induire une déshydratation partielle. Ce processus abaisse
efficacement le point de congélation, ce qui entraîne une réduction de l'engourdissement
et une taille plus petite des cristaux de glace (Rosato et Laffaldano, 2013). Ces agents
peuvent être classés en deux groupes principaux.
Agents perméables : Le cryoprotecteur le plus utilisé dans le monde est le glycérol. Il
possède la capacité d’agir à la fois à l’intérieur et à l’extérieur des cellules. Le glycérol
pénètre dans les spermatozoïdes et modifie la structure des cristaux de glace qui se
développent, ce qui donne une forme plus sphérique. Cette modification diminue le
risque de perforation de la membrane, comme l'ont indiqué Stănescu et Alin en 2010.
Découvert par Loverlok et Bishop en 1959, le diméthylsulfoxyde (DMSO) est un
cryoprotecteur intracellulaire qui présente une pénétration rapide, réduisant ainsi la période
d'équilibre (Billard et Legendre, 1980).
Des études ont démontré que l'éthylène glycol (EG) possède des propriétés
cryoprotectrices (Ana et al., 2006). L'amélioration de la qualité du sperme, y compris la
viabilité, l'intégrité des acrosomes et des membranes, ainsi qu'une réduction des anomalies de
l'expression de la mobilité, ont été observées avec l'utilisation d'éthylène glycol, comme l'ont
rapporté Swelum et al. en 2011.
Agents non perméables
Le jaune d'œuf, que l'on retrouve dans les agents de congélation du sperme de lapin, est
généralement utilisé à des concentrations allant de 10 à 20 % (Mocé et Vicente, 2009). Le lait
écrémé, en particulier la version sans lipides, sert d'agent protecteur à la fois pour le sperme et