Matériel et méthodes
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II-7- Antibiorésistance des souches isolées (Antibiogramme)
L’antibiogramme est une technique de laboratoire visant à tester la sensibilité d'une souche
bactérienne vis-à-vis d’un ou de plusieurs antibiotiques. Cette sensibilité a été testée par la
méthode de diffusion sur milieu Muller-Hinton. Les souches d’entérocoques isolées ont été
soumises à une liste de molécules d’antibiotiques (Tableau 7). L’interprétation des résultats, a
été faite selon le manuel du comité de l’antibiogramme de la société française de microbiologie
(CASFM, 2023).
Mode opératoire :
Standardisation de la suspension :
Des suspensions bactériennes ont été préparées à partir de cultures jeunes dans de l’eau
physiologique.
La densité optique de la suspension bactérienne est ajustée à 0,5 Mc Farland.
L’inoculum doit être employé dans les 15min qui suivent sa préparation.
Ensemencement :
Des boites de pétri préalablement remplies par 25ml de la gélose Müller-Hinton (CASFM,
2023) sont ensemencées à l’aide d’un écouvillon stérile, introduit dans la suspension
bactérienne et essoré contre la paroi interne du tube. Des stries parallèles et aussi serrées que
possible sont réalisées à la surface de la gélose. L’opération est répétée trois fois en tournant la
boité à 60° et en tournant l’écouvillon sur lui-même.
Dépôts des disques :
Des disques d’antibiotiques sont appliqués à l’aide d’une pince stérile, sur la gélose inoculée,
selon la figure 37. Une fois le disque déposé, il ne doit pas être déplacée car les antibiotiques
diffusent rapidement. Il ne faut pas laisser les boites plus de 15min sur la paillasse.
L’incubation se fait à 37°C pendant 24h.
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II-7- Antibiorésistance des souches isolées (Antibiogramme)
L’antibiogramme est une technique de laboratoire visant à tester la sensibilité d'une souche
bactérienne vis-à-vis d’un ou de plusieurs antibiotiques. Cette sensibilité a été testée par la
méthode de diffusion sur milieu Muller-Hinton. Les souches d’entérocoques isolées ont été
soumises à une liste de molécules d’antibiotiques (Tableau 7). L’interprétation des résultats, a
été faite selon le manuel du comité de l’antibiogramme de la société française de microbiologie
(CASFM, 2023).
Mode opératoire :
Standardisation de la suspension :
Des suspensions bactériennes ont été préparées à partir de cultures jeunes dans de l’eau
physiologique.
La densité optique de la suspension bactérienne est ajustée à 0,5 Mc Farland.
L’inoculum doit être employé dans les 15min qui suivent sa préparation.
Ensemencement :
Des boites de pétri préalablement remplies par 25ml de la gélose Müller-Hinton (CASFM,
2023) sont ensemencées à l’aide d’un écouvillon stérile, introduit dans la suspension
bactérienne et essoré contre la paroi interne du tube. Des stries parallèles et aussi serrées que
possible sont réalisées à la surface de la gélose. L’opération est répétée trois fois en tournant la
boité à 60° et en tournant l’écouvillon sur lui-même.
Dépôts des disques :
Des disques d’antibiotiques sont appliqués à l’aide d’une pince stérile, sur la gélose inoculée,
selon la figure 37. Une fois le disque déposé, il ne doit pas être déplacée car les antibiotiques
diffusent rapidement. Il ne faut pas laisser les boites plus de 15min sur la paillasse.
L’incubation se fait à 37°C pendant 24h.