Matériels et méthodes
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La méthode repose sur la mesure de l'absorbance de la chlorophylle à une longueur d'onde
précise dans un solvant adapté. La mesure de la chlorophylle a servi à évaluer la masse totale
de phytoplancton dans un environnement marin. Ce pigment se trouve chez tous les organismes
photosynthétiques qui respirent de l'oxygène et est influencé par la lumière et la température,
pouvant se décomposer en présence d'acide.
La concentration de chlorophylle est utilisée pour l’estimation de la production primaire
(Eppley and Peterson, 1979).
3.5.5.2 Analyse au laboratoire
Filtration et extraction
-L'eau de mer est filtrée le jour même de sa collecte en mer.
-Des échantillons de 2 litres sont filtrés à travers des disques filtrants en fibres de verre (type
Wattman GF/C, diamètre 47 mm et une porosité de 0,7 µm). Le processus de filtration se
déroule sur une rampe à filtration sous vide.
-Les filtres obtenus sont récupérés à l'aide de deux pincettes.
-Chaque filtre est ensuite placé dans un tube contenant 5 ml d'acétone à 90 %.
-Les filtres sont délicatement broyés à l'aide d'une tige en verre.
-Après le broyage initial, 5 ml d'acétone sont ajoutés.
-Le tube est ensuite couvert et conservé dans le réfrigérateur, à l'abri de la lumière, pendant 24
heures.
Centrifugation
Après avoir terminé l'extraction, mettez les tubes dans la centrifugeuse pendant 5 minutes à
3500 tours par minute, puis retirez-les et tentez de faire tomber les résidus de filtre collés aux
parois du tube en effectuant un léger mouvement. Centrifugez à nouveau pendant 10 minutes à
3500 tours par minute, puis transférez le surnageant dans une cuve de mesure
spectrophotométrique à l'aide d'une micropipette, en veillant à ne pas aspirer de filtre.
Mesures des absorbances
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La méthode repose sur la mesure de l'absorbance de la chlorophylle à une longueur d'onde
précise dans un solvant adapté. La mesure de la chlorophylle a servi à évaluer la masse totale
de phytoplancton dans un environnement marin. Ce pigment se trouve chez tous les organismes
photosynthétiques qui respirent de l'oxygène et est influencé par la lumière et la température,
pouvant se décomposer en présence d'acide.
La concentration de chlorophylle est utilisée pour l’estimation de la production primaire
(Eppley and Peterson, 1979).
3.5.5.2 Analyse au laboratoire
Filtration et extraction
-L'eau de mer est filtrée le jour même de sa collecte en mer.
-Des échantillons de 2 litres sont filtrés à travers des disques filtrants en fibres de verre (type
Wattman GF/C, diamètre 47 mm et une porosité de 0,7 µm). Le processus de filtration se
déroule sur une rampe à filtration sous vide.
-Les filtres obtenus sont récupérés à l'aide de deux pincettes.
-Chaque filtre est ensuite placé dans un tube contenant 5 ml d'acétone à 90 %.
-Les filtres sont délicatement broyés à l'aide d'une tige en verre.
-Après le broyage initial, 5 ml d'acétone sont ajoutés.
-Le tube est ensuite couvert et conservé dans le réfrigérateur, à l'abri de la lumière, pendant 24
heures.
Centrifugation
Après avoir terminé l'extraction, mettez les tubes dans la centrifugeuse pendant 5 minutes à
3500 tours par minute, puis retirez-les et tentez de faire tomber les résidus de filtre collés aux
parois du tube en effectuant un léger mouvement. Centrifugez à nouveau pendant 10 minutes à
3500 tours par minute, puis transférez le surnageant dans une cuve de mesure
spectrophotométrique à l'aide d'une micropipette, en veillant à ne pas aspirer de filtre.
Mesures des absorbances