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• Mise en culture :
Avant toute manipulation, la zone des manipulations doit être stérile et tout le travail doit
se faire proximité du bec Benzen.
La stérilisation du F/2 Guillard s'effectue par voie thermique grâce à un autoclavage. Le milieu
est ensuite conservé dans un système frigorifique à une température de 4°C (température inhibant
la prolifération de germes pathogènes).
La mise en culture est réalisé en multipliant le volume des cultures par un facteur de 4 à 5 à
chacune des étapes en passant d'un volume de 50 ml à 250 ml puis à 250ml puis à 1L et en
dernier 20 Les étapes correspondent à la multiplication algale (Figure II.1-16-17).
Le début de chaque culture est caractérisé par une étape d'inoculation qui consiste à introduire
l'inoculum dans un milieu de culture
• Entretien des cultures :
La flamme est placée à 3-4 cm du col du ballon à ensemencer. Ce ballon est débouché dans
la zone aseptique. Il en est de même pour l’inoculum. Il est versé dans le nouveau milieu de
culture en restant bien dans la sphère stérile. Il faut prendre garde à ne pas verser le dépôt qui se
trouve au font du ballon d’inoculum. Ce dépôt est formé de cellules mortes qui pourraient freiner
la croissance de la culture.
Toutes les cultures sont incubées à 24º à 28ºC près d’une source lumineuse.
Figure II-16: Différentes étapes de production de Chlorella sp
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