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• Préparation de l’échantillon en Microscope inversé :
La première étape consiste à fixer l’échantillon. Il est nécessaire de l’incuber dans les chambres
de sédimentations (cuves) de 25 ml. Le temps de sédimentation est de 12 heures avec quelques
gouttes de lugole. L’échantillon ainsi préparé est prêt à être observé au microscope inversé.
Après l’identification on a pu classer l’espèce en genre Paramecium, (Figure II.1-9).
Figure II-9 : Paramecium sp, observation avec microscope inversé MOTIC AE4.
II.1.4.2 Isolement de la souche Chorella sp.
Le milieu de culture Guillard f/2 gélosé a été utilisé pour l'isolement de chlorella sp. Le
milieu de culture est stérilisé à l’autoclave à 120°C pendant 20 minutes. Une fois refroidi à
environ 50°C, 15 à 20 mL du milieu encore liquide sont coulés dans des boîtes de pétri dans une
zone stérile auprès de becs bunsen. Après solidification du milieu gélosé, les boites de Pétri sont
utilisées pour l'ensemencement.
Ensemencement en surface par étalement :
− Déposer 100 µl de la souche à la surface du milieu de culture coulé et solidifié,
− Constituer un râteau à l’aide d’une pipette Pasteur,
− Etaler la goutte de la souche par ce râteau, puis incuber.
• Préparation de l’échantillon en Microscope inversé :
La première étape consiste à fixer l’échantillon. Il est nécessaire de l’incuber dans les chambres
de sédimentations (cuves) de 25 ml. Le temps de sédimentation est de 12 heures avec quelques
gouttes de lugole. L’échantillon ainsi préparé est prêt à être observé au microscope inversé.
Après l’identification on a pu classer l’espèce en genre Paramecium, (Figure II.1-9).
Figure II-9 : Paramecium sp, observation avec microscope inversé MOTIC AE4.
II.1.4.2 Isolement de la souche Chorella sp.
Le milieu de culture Guillard f/2 gélosé a été utilisé pour l'isolement de chlorella sp. Le
milieu de culture est stérilisé à l’autoclave à 120°C pendant 20 minutes. Une fois refroidi à
environ 50°C, 15 à 20 mL du milieu encore liquide sont coulés dans des boîtes de pétri dans une
zone stérile auprès de becs bunsen. Après solidification du milieu gélosé, les boites de Pétri sont
utilisées pour l'ensemencement.
Ensemencement en surface par étalement :
− Déposer 100 µl de la souche à la surface du milieu de culture coulé et solidifié,
− Constituer un râteau à l’aide d’une pipette Pasteur,
− Etaler la goutte de la souche par ce râteau, puis incuber.