Chapitre IV : Matériels et méthodes
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V0 = volume de sulfate de fer et d’ammonium nécessaire au dosage (ml).
V1 = volume de sulfate de fer et d’ammonium nécessaire à l’essai à blanc (ml).
T = titre de la solution de sulfate de fer et d’ammonium.
V =volume de prise d’essai.
3.4. Demande biochimique en oxygène (DBO5)
❖ Matériel
Récipient 10 l (eau de dilution), aérateur, flacon bouché 1 l (prélèvement), flacons à bouchon
rodé 200 à 300 ml (mesure), pipettes, éprouvettes graduées, étuve 20°C.
Matériel pour dosage O2 dissous.
❖ Mode opératoire
➢ Prélèvement de l'eau à analyser.
➢ Préparation de l'eau de dilution : mettre la veille du prélèvement, dans un récipient
de 10 l, de l'eau du robinet dans laquelle on plonge toute la journée un aérateur
d'aquarium pour la saturer en dioxygène. Laisser reposer 12 h.
➢ Choix du facteur de dilution : Le facteur de dilution dépendra de la charge de l'eau
analysée. Par exemple, on choisira un facteur de dilution de l'ordre de 10 pour une eau
de surface (DBO moyenne = 1 à 30 mg/l) ou de 50 à 100 pour une eau usée (DBO
moyenne = 300 mg/l pour un effluent domestique).
➢ Concrètement, si en début de mesure l'eau est saturée en dioxygène (8 mg/l), pour une
eau usée (DBO de l'ordre de 300 mg/l), on choisira un facteur de dilution F de l'ordre
de 300 / (8-8/2) = 75. Si l'on dispose d'un flacon de 150 ml, en diluant 2 ml d'eau usée
dans 148 ml d'eau de dilution on obtient un facteur de dilution F = 148/2 = 74
convenable.
➢ Préparation des flacons de mesure : verser dans le flacon un peu d'eau de dilution
puis la quantité prévue d'échantillon puis remplir le reste du flacon avec l'eau de
dilution. Fermer le flacon sans y laisser d'air. Faire ainsi 2 flacons identiques. Préparer
2 autres flacons avec uniquement de l'eau de dilution (blancs). Toutes ces opérations
seront réalisées en veillant à ne pas modifier la teneur en dioxygène dissous.
➢ Mesure au temps 0 : doser l'O2 dissous (voir protocole dosage dans le paragraphe 3)
dans un flacon d'échantillon dilué (T0) et dans un flacon d'eau de dilution (D0). Jeter
l'eau.
➢ Incubation : placer les 2 flacons restants à l'étuve 20°C et à l'obscurité pendant 5
jours.
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V0 = volume de sulfate de fer et d’ammonium nécessaire au dosage (ml).
V1 = volume de sulfate de fer et d’ammonium nécessaire à l’essai à blanc (ml).
T = titre de la solution de sulfate de fer et d’ammonium.
V =volume de prise d’essai.
3.4. Demande biochimique en oxygène (DBO5)
❖ Matériel
Récipient 10 l (eau de dilution), aérateur, flacon bouché 1 l (prélèvement), flacons à bouchon
rodé 200 à 300 ml (mesure), pipettes, éprouvettes graduées, étuve 20°C.
Matériel pour dosage O2 dissous.
❖ Mode opératoire
➢ Prélèvement de l'eau à analyser.
➢ Préparation de l'eau de dilution : mettre la veille du prélèvement, dans un récipient
de 10 l, de l'eau du robinet dans laquelle on plonge toute la journée un aérateur
d'aquarium pour la saturer en dioxygène. Laisser reposer 12 h.
➢ Choix du facteur de dilution : Le facteur de dilution dépendra de la charge de l'eau
analysée. Par exemple, on choisira un facteur de dilution de l'ordre de 10 pour une eau
de surface (DBO moyenne = 1 à 30 mg/l) ou de 50 à 100 pour une eau usée (DBO
moyenne = 300 mg/l pour un effluent domestique).
➢ Concrètement, si en début de mesure l'eau est saturée en dioxygène (8 mg/l), pour une
eau usée (DBO de l'ordre de 300 mg/l), on choisira un facteur de dilution F de l'ordre
de 300 / (8-8/2) = 75. Si l'on dispose d'un flacon de 150 ml, en diluant 2 ml d'eau usée
dans 148 ml d'eau de dilution on obtient un facteur de dilution F = 148/2 = 74
convenable.
➢ Préparation des flacons de mesure : verser dans le flacon un peu d'eau de dilution
puis la quantité prévue d'échantillon puis remplir le reste du flacon avec l'eau de
dilution. Fermer le flacon sans y laisser d'air. Faire ainsi 2 flacons identiques. Préparer
2 autres flacons avec uniquement de l'eau de dilution (blancs). Toutes ces opérations
seront réalisées en veillant à ne pas modifier la teneur en dioxygène dissous.
➢ Mesure au temps 0 : doser l'O2 dissous (voir protocole dosage dans le paragraphe 3)
dans un flacon d'échantillon dilué (T0) et dans un flacon d'eau de dilution (D0). Jeter
l'eau.
➢ Incubation : placer les 2 flacons restants à l'étuve 20°C et à l'obscurité pendant 5
jours.