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sulfanilamide et couplage avec le dihydrochlorure d'alpha-naphytylhylenediamine pour former un
colorant azoïque très coloré qui est mesuré à 540 nm.
Les réactifs exigés
Solution tampon :
o Réactifs 1 : chlorite d’ammonium
o Réactifs 2 : solution d'ammoniaque
o Réactifs 3 : hydroxyde de sodium
o Réactifs 4 : Bridj
Solution coloré :
o Réactifs 1 : d’acide o-phosphorique
o Réactifs 2 : sulfanilamide
o Réactifs 3 : α-naphtyléthylène diamine dihydrochloride.
La préparation des réactifs est décrite en Annexe 5.
Etalonnage
•
Introduire , dans des fioles jaugées de 100 ml, 70µl, 140µl, 210µl, 280µl, 350µl, 700µl de
l’étalon í µí±í µí± 3 et aussi 40µl, 80µl, 120µl, 160µl, 200µl, 240µl de l’étalon í µí±í µí± 2 et compléter à 100ml
avec l’eau distillée, afin d’obtenir la gamme de concentrations : 0.5µmol/l, 1µmol/l, 1.5µmol/l,
2µmol/l, 2.5µmol/l, 5µmol/l de í µí±í µí± 3 et 0.2µmol/l, 0.4µmol/l, 0.6µmol/l, 0.8µmol/l, 1µmol/l,
1.2µmol/l de í µí±í µí± 2 .
•
Faire l’analyse de ces étalons.
•
Mesurer l’absorbance et tracer la courbe d’étalonnage.
La courbe d’étalonnage établit (Figure 9) à pour l’équation y=226.2x avec í µí±¹
í µí¿ =0.860
Figure 9 : Courbe d’étalonnage des Nitrites et Nitrates
y = 226.28x
R² = 0.9529
0
200
400
600
800
1000
1200
0
1
2
3
4
5
6
NO3/NO2 µmol/l
sulfanilamide et couplage avec le dihydrochlorure d'alpha-naphytylhylenediamine pour former un
colorant azoïque très coloré qui est mesuré à 540 nm.
Les réactifs exigés
Solution tampon :
o Réactifs 1 : chlorite d’ammonium
o Réactifs 2 : solution d'ammoniaque
o Réactifs 3 : hydroxyde de sodium
o Réactifs 4 : Bridj
Solution coloré :
o Réactifs 1 : d’acide o-phosphorique
o Réactifs 2 : sulfanilamide
o Réactifs 3 : α-naphtyléthylène diamine dihydrochloride.
La préparation des réactifs est décrite en Annexe 5.
Etalonnage
•
Introduire , dans des fioles jaugées de 100 ml, 70µl, 140µl, 210µl, 280µl, 350µl, 700µl de
l’étalon í µí±í µí± 3 et aussi 40µl, 80µl, 120µl, 160µl, 200µl, 240µl de l’étalon í µí±í µí± 2 et compléter à 100ml
avec l’eau distillée, afin d’obtenir la gamme de concentrations : 0.5µmol/l, 1µmol/l, 1.5µmol/l,
2µmol/l, 2.5µmol/l, 5µmol/l de í µí±í µí± 3 et 0.2µmol/l, 0.4µmol/l, 0.6µmol/l, 0.8µmol/l, 1µmol/l,
1.2µmol/l de í µí±í µí± 2 .
•
Faire l’analyse de ces étalons.
•
Mesurer l’absorbance et tracer la courbe d’étalonnage.
La courbe d’étalonnage établit (Figure 9) à pour l’équation y=226.2x avec í µí±¹
í µí¿ =0.860
Figure 9 : Courbe d’étalonnage des Nitrites et Nitrates
y = 226.28x
R² = 0.9529
0
200
400
600
800
1000
1200
0
1
2
3
4
5
6
NO3/NO2 µmol/l