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L'électrophorèse est une technique d'analyse et de fractionnement basées
sur la migration différentielle d'ions, de macromolécules ou de particules
sous l'effet d'un champ électrique.
L'électrophorèse est le plus souvent réalisée au sein d'un support poreux
imprégné de tampon de migration qui fixe la charge des molécules à
séparer.
Cette technique permet une très bonne résolution (séparation) des molécules séparées en bandes ou « spots » (à colorer ensuite) : c'est l' électrophorèse de zone.
La vitesse à laquelle les n1olécules chargées migrent dans un champ électrique dépend de trois facteurs :
• Elle est proportionnelle à la charge de la particule : plus elle est chargée, plus la molécule migre vite et donc loin en un temps donné.
• Elle est inversement proportionnelle au rayon de la particule, donc à sa
taille : plus la molécule chargée est petite, plus elle migre vite.
• Elle est inversement proportionnelle à la viscosité du milieu : plus le
milieu est visqueux, plus la migration est ralentie
Généralement, on sépare des molécules en fonction de leur taille (et de
leurs charges) : les plus petites molécules migrent le plus loin alors que les
grosses molécules sont ralenties pendant la migration .
L'électrophorèse est le plus souvent réalisée sur trois types de supports :
• Papier : presque abandonné, pour séparer acides aminés, oses ...
• Acétate de cellulose et amidon : courants, pour les protéines.
• Les gels d'agarose et de polyacrylamide, préférables pour les séparations très fines de protéines et d'acides nucléiques.
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L'électrophorèse est le plus souvent réalisée au sein d'un support poreux
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Cette technique permet une très bonne résolution (séparation) des molécules séparées en bandes ou « spots » (à colorer ensuite) : c'est l' électrophorèse de zone.
La vitesse à laquelle les n1olécules chargées migrent dans un champ électrique dépend de trois facteurs :
• Elle est proportionnelle à la charge de la particule : plus elle est chargée, plus la molécule migre vite et donc loin en un temps donné.
• Elle est inversement proportionnelle au rayon de la particule, donc à sa
taille : plus la molécule chargée est petite, plus elle migre vite.
• Elle est inversement proportionnelle à la viscosité du milieu : plus le
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Généralement, on sépare des molécules en fonction de leur taille (et de
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L'électrophorèse est le plus souvent réalisée sur trois types de supports :
• Papier : presque abandonné, pour séparer acides aminés, oses ...
• Acétate de cellulose et amidon : courants, pour les protéines.
• Les gels d'agarose et de polyacrylamide, préférables pour les séparations très fines de protéines et d'acides nucléiques.
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