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Les anticorps (Ac) sont souvent utilisés au laboratoire de biologie d,analyse et de recherche. Selon leur capacité à reconnaître un ou plusieurs
épitopes (partie de l'antigène fixée par l'Ac) d,un même antigène, on distingue respectivement les anticorps monoclonaux et polyclonaux.
Immunisation de
l'animal
ex : lapin
Choix de l'animal
Récolte de
l'antisérum
(ou «immunsérum)
en fonction de l'antigène
Par saignée
et de la capacité de l'animal
de l'animal
à produire beaucoup d'anticorps
de
l'antisérum
Par
chromatographie
d'affinité
Ie. ,bnJ, , Q . u. e . . "' ci.e., , .. . P., , r.o. d . . u. ~ti0,. n . . . . . ci, , ~. a. n. t. ~. ~ . . Q . r. P. . . s . . . . . l.l. Q . J . Y. u, ç.l.o . .n. a. u. ~.
Les Ac polyclonaux sont des mélanges d' Ac sériques dirigés contre r ensemble des épitopes d,un immunogène donné. Les différents Ac sont produits par un ensemble de clones différents de plasmocytes (donc par des
clones de LB différents).
Immunisation d'une
Obtention de
souris avec
-~ LB activés
Culture en milieu HAT
Formation de .........._
hybridomes """11'r'" Sélection des
un Ag donné
Prélèvement de la rate
Fusion d 'un LB activé
hybridomes
t
et récupération des LB
et d'une cellule
parmi les cellules spléniques cancéreuse (myélome)
Production de
. . . l'anticorps ..,._ Criblage (screening) :..Clonage
•••Ill monoclonal
Injection d'hybridomes
sélectionnés dans la cavité péritonéale
d 'une souris ou culture in vitro
Repérage des clones
sécrétant l'anticorps désiré
Technique des
dilutions
Il est souvent utile de réaliser des analyses avec des Ac d,affinité unique
et dirigés contre un seul épitope. Ces Ac monoclonaux tous identiques
sont obtenus à partir d,un seul clone de plasmocytes.