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Q
©
En cas de test Elisa de détection des anticorps anti-VIH positif ou douteux (deux résultats du test ELISA contradictoires), la loi oblige les laboratoires à réaliser un test de confirmation sur un autre prélèvement et par
une autre technique : on réalise alors un test de Western Blot, beaucoup
plus fiable que le test Elisa mais plus coûteux et de mise en œuvre plus
délicate.
Première étape : séparation de protéines virales « synthétiques » (issues
de cellules infectées par le VIH) par électrophorèse sur gel de polyacrylamide. On obtient différentes bandes contenant un seul Ag viral.
Deuxième étape : transfert (dans un champ électrique) des protéines depuis le gel d'électrophorèse vers une membrane de nitrocellulose.
Troisième étape: on additionne le sérum du patient. Si ce sérum contient
des anticorps anti-VIH, ils vont se fixer sur les bandes correspondant aux
antigènes spécifiques. Cette réaction antigène-anticorps est révélée par
réaction enzymatique colorée (comme le test Elisa).
Lysat (Antigènes)
de cellules
infectées par le VIH
+
Séparation
des
antigènes
viraux
(protéines)
Première étape :
électrophorèse
d'antigènes viraux
Suppo
+
Déplacement
des Ag viraux
(vue de profil)
Deuxième étape :
Transfert sur membrane
de nitrocellulose
grâce à un
champ électrique
Membrane de
nitrocellulose
Troisième étape :
Réaction immunologique
sur la membrane de
nitrocellulose
Principe du Wester n Blot
Mise en
évidence
des anticorps
J anti ..
gp160
gp120
p68
p55
gp 41
p40
p17
Résultat
positif
après dépôt
du sérum et
révélation
185
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une autre technique : on réalise alors un test de Western Blot, beaucoup
plus fiable que le test Elisa mais plus coûteux et de mise en œuvre plus
délicate.
Première étape : séparation de protéines virales « synthétiques » (issues
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Deuxième étape : transfert (dans un champ électrique) des protéines depuis le gel d'électrophorèse vers une membrane de nitrocellulose.
Troisième étape: on additionne le sérum du patient. Si ce sérum contient
des anticorps anti-VIH, ils vont se fixer sur les bandes correspondant aux
antigènes spécifiques. Cette réaction antigène-anticorps est révélée par
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Lysat (Antigènes)
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