CHLOROPHYLLE - FLUORIMÉTRIE
— (8/92) acétone/éther de pétrole (40-60 °C) : élution de la chlorophylle b.
Le solvant contenant la chlorophylle a est évaporé sous azote et le pigment sec immédiatement récupéré dans l’acétone à 90 %.
Pour vérifier la pureté du pigment, enregistrer son spectre d’absorption
et le comparer au spectre témoin dans l’acétone à 90 % (figure XVI. 1). Vérifier que :
— le rapport des absorbances, au niveau des maximums bleu et rouge,
soit A431i5/A663>7, est voisin de 1,15;
— le rapport A4315/A410 est voisin de 1,23.
BIBLIOGRAPHIE
Déroché, M. E., 1971. Amélioration de la séparation chromatographique des pigments liposolubles en carotènes, xanthophylles et chlorophylles. Chim. anal. 53,
704-709.
Holm-Hansen, O., Lorenzen, C. J., Holmes, R. W. and Strickland, J. D. H., 1965.
Fluorimetric détermination of chlorophyll. J. Cons. Perm. Int. Explor. Mer 30, 3-15.
Iriyama, K., Ogura, N. and Takamiya, A., 1974. A simple method for extraction and
partial purification of chlorophyll from plant material, using dioxane. J. Biochem.
76, 901-904.
Jeffrey, S. W. and Humphrey, G. F., 1975. New spectrophotometric équations for
determining chlorophylls a, b, c1 and c2 in algae, phytoplankton and higher plants.
Biochem. Physiol. Pflanz. 167, 191-194.
Loftus, M. E. and Carpenter, J. H., 1971. A fluorimetric method for determining
chlorophylls a, b and c. J. Mar. Res. 29 (3), 319-338.
Lorenzen, C. J., 1966. A method for the continuons measurement of in vivo chlorophyll concentration. Deep-Sea Res. 13, 223-227.
Lorenzen, C. J., 1967. Détermination of chlorophyll and pheophytin : spectrophotometric équations. Limnol. Oceanogr. 12, 343-346.
Neveux, J., 1976. Dosage de la chlorophylle a et de la phéophytine a par fluorimétrie. Ann. Inst. Océanogr. 52, 165-174.
Yentsch, C. S. and Menzel, D. W., 1963. A method for the détermination of phytoplankton chlorophyll and pheophytin by fluorescence. Deep-Sea Res. 10, 221-231.
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— (8/92) acétone/éther de pétrole (40-60 °C) : élution de la chlorophylle b.
Le solvant contenant la chlorophylle a est évaporé sous azote et le pigment sec immédiatement récupéré dans l’acétone à 90 %.
Pour vérifier la pureté du pigment, enregistrer son spectre d’absorption
et le comparer au spectre témoin dans l’acétone à 90 % (figure XVI. 1). Vérifier que :
— le rapport des absorbances, au niveau des maximums bleu et rouge,
soit A431i5/A663>7, est voisin de 1,15;
— le rapport A4315/A410 est voisin de 1,23.
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partial purification of chlorophyll from plant material, using dioxane. J. Biochem.
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chlorophylls a, b and c. J. Mar. Res. 29 (3), 319-338.
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Neveux, J., 1976. Dosage de la chlorophylle a et de la phéophytine a par fluorimétrie. Ann. Inst. Océanogr. 52, 165-174.
Yentsch, C. S. and Menzel, D. W., 1963. A method for the détermination of phytoplankton chlorophyll and pheophytin by fluorescence. Deep-Sea Res. 10, 221-231.
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