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Microbiologie pratique pour le laboratoire d analyses ou de contrôle sanitaire
1.3.2. Autoclavage
Le principe de l'autoclavage, I utilisation de 1 appareil et les contrôles de stérilisation sont traités dans la première partie du chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture », paragraphe 3.1.
1.4.
Bains-marie ou bains thermostatés
Les bains peuvent être des bains-marie, des bains à sec, thermostatés, d’huile
(pourvus parfois d’un système d’agitation)...
Les bains utilisés couramment en microbiologie de routine sont des bainsmarie à eau ou des bains thermostatés (recommandés par la norme NF ISO
7218). Un bain thermostaté se différencie d’un bain-marie par une agitation du
liquide dans le bain grâce à une pompe à circulation.
Ces bains assurent le maintien de « substances », par immersion, à une température déterminée et stable, avec une précision de ± 0,5 °C. '
Ils sont constitués de cuves en acier inoxydable avec couvercle, ayant différentes capacités ; ils sont équipés pour travailler à des températures dépassant de
5 °C la température ambiante et allant jusqu’à + 100 °C. Au travers de plus de
150 modèles, ils offrent diverses options et accessoires en fonction des besoins
et des applications.
Dans la pratique courante, en microbiologie, ils servent principalement à :
- liquéfier des milieux gélosés (en tubes ou en flacons) au bain-marie
bouillant, puis à les transférer dans un deuxième bain-marie à 47 ± 2 °C pour les
maintenir en surfusion jusqu’à leur utilisation ;
- incuber des milieux de cultures préparés en tubes à hémolyse et ensemencés
en vue de la réalisation de tests biochimiques (test ONPG-hydrolase à 37 °C, par
exemple : cf. première partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne », paragraphe 2.2.3.2.) ;
traiter à 80 ± 0.2 °C des échantillons d'eaux (en tubes) pendant 10 minutes pour
détruire les cellules végétatives et sélectionner les spores des bactéries anaérobies sulhtoréductrices ( 1.5.
Réfrigérateurs, glacières et congélateurs
1.5.1. Réfrigérateurs
IX * s
réfrigérateurs de laboratoire ou professionnels, de différentes capacités,
ventilés (température réglable de 0 °C à + 15 °C), non ventilés (température de
+ 2à+12 C)... sont disponibles.
I n laboratoire de microbiologie doit disposer d'un réfrigérateur de laboratoire
(et/ou d une chambre froide) par type d'utilisation (cf. recommandations de la
norme NF ISO 7218 de 1996) :
premier réfrigérateur . il sert à la conservation des milieux de culture prépares ou achetés prêt à I emploi, des réactifs biologiques à 3 ± 2 °C ;
Microbiologie pratique pour le laboratoire d analyses ou de contrôle sanitaire
1.3.2. Autoclavage
Le principe de l'autoclavage, I utilisation de 1 appareil et les contrôles de stérilisation sont traités dans la première partie du chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture », paragraphe 3.1.
1.4.
Bains-marie ou bains thermostatés
Les bains peuvent être des bains-marie, des bains à sec, thermostatés, d’huile
(pourvus parfois d’un système d’agitation)...
Les bains utilisés couramment en microbiologie de routine sont des bainsmarie à eau ou des bains thermostatés (recommandés par la norme NF ISO
7218). Un bain thermostaté se différencie d’un bain-marie par une agitation du
liquide dans le bain grâce à une pompe à circulation.
Ces bains assurent le maintien de « substances », par immersion, à une température déterminée et stable, avec une précision de ± 0,5 °C. '
Ils sont constitués de cuves en acier inoxydable avec couvercle, ayant différentes capacités ; ils sont équipés pour travailler à des températures dépassant de
5 °C la température ambiante et allant jusqu’à + 100 °C. Au travers de plus de
150 modèles, ils offrent diverses options et accessoires en fonction des besoins
et des applications.
Dans la pratique courante, en microbiologie, ils servent principalement à :
- liquéfier des milieux gélosés (en tubes ou en flacons) au bain-marie
bouillant, puis à les transférer dans un deuxième bain-marie à 47 ± 2 °C pour les
maintenir en surfusion jusqu’à leur utilisation ;
- incuber des milieux de cultures préparés en tubes à hémolyse et ensemencés
en vue de la réalisation de tests biochimiques (test ONPG-hydrolase à 37 °C, par
exemple : cf. première partie, chapitre 5 « Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne », paragraphe 2.2.3.2.) ;
traiter à 80 ± 0.2 °C des échantillons d'eaux (en tubes) pendant 10 minutes pour
détruire les cellules végétatives et sélectionner les spores des bactéries anaérobies sulhtoréductrices ( 1.5.
Réfrigérateurs, glacières et congélateurs
1.5.1. Réfrigérateurs
IX * s
réfrigérateurs de laboratoire ou professionnels, de différentes capacités,
ventilés (température réglable de 0 °C à + 15 °C), non ventilés (température de
+ 2à+12 C)... sont disponibles.
I n laboratoire de microbiologie doit disposer d'un réfrigérateur de laboratoire
(et/ou d une chambre froide) par type d'utilisation (cf. recommandations de la
norme NF ISO 7218 de 1996) :
premier réfrigérateur . il sert à la conservation des milieux de culture prépares ou achetés prêt à I emploi, des réactifs biologiques à 3 ± 2 °C ;