Méthodes de travail en microbiologie
95
spécifiques : cf. infra, paragraphe 3.2.1.2.) et le laisser en surfusion dans un bainmarie à 47 ± 2 °C.
32.1.1. Avec les géloses PC A
► En microbiologie des eaux
La gélose PCA sans glucose ou gélose à l’extrait de levure Bio-Rad est utilisée
pour le dénombrement des micro-organismes revivifiables dans les eaux par la
technique de numération des colonies en aérobiose à 22 °C et à 36 °C selon la
méthode par incorporation en milieu nutritif gélosé. Elle est conforme à la norme
NF EN ISO 6222 (1999).
La formule type de ce milieu de culture en g/L d'eau distillée est :
Tryptone.................................................................................................. 6
Extrait de levure..................................................................................... 3
Agar............................................................................................................ 12
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 121 ± 3 °C pendant 15 minutes
► En microbiologie alimentaire
Le milieu Standard Methods Agar (PCA) bioMérieux” SA est utilisée pour le
dénombrement des micro-organismes aérobies (bactéries, levures et moisissures)
se développant à 30 °C dans les produits alimentaires destinés à la consommation
humaine ou à l’alimentation animale.
Il est ainsi conforme à la norme NF EN ISO 4833 (2003) qui impose l'utilisation d’une gélose PCA avec glucose pour ces denrées alimentaires, ainsi qu'à
la méthode de routine de la norme NF V 08-051 (1999). La première nonne est
citée comme méthode d’analyse de référence, pour la recherche du « nombre de
colonies aérobies » dans certaines denrées alimentaires, d’après le règlement
(CE) n° 2073/2005 de la Commission des Communautés européennes du
15 novembre 2005 {cf. deuxième partie, chapitre 1 « Principaux micro-organismes recherchés en routine », paragraphe 1.1.1.2.).
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d'eau purifiée est :
Peptone de caséine (bovin)...................................................................
5,0
Extrait de levure....................................................................................
2,5
Glucose....................................................................................................
1
Agar.......................................................................................................... 15
pH 7,0
Stérilisation à l’autoclave : 15 minutes à 120 °C
► Mode opératoire
-déposer tout d'abord 1 mL de l’échantillon ou de la suspension mère (première dilution) dans une boîte de Petri vide stérile à l'aide d'une pipette de 1 ml
stérile à usage unique ;
95
spécifiques : cf. infra, paragraphe 3.2.1.2.) et le laisser en surfusion dans un bainmarie à 47 ± 2 °C.
32.1.1. Avec les géloses PC A
► En microbiologie des eaux
La gélose PCA sans glucose ou gélose à l’extrait de levure Bio-Rad est utilisée
pour le dénombrement des micro-organismes revivifiables dans les eaux par la
technique de numération des colonies en aérobiose à 22 °C et à 36 °C selon la
méthode par incorporation en milieu nutritif gélosé. Elle est conforme à la norme
NF EN ISO 6222 (1999).
La formule type de ce milieu de culture en g/L d'eau distillée est :
Tryptone.................................................................................................. 6
Extrait de levure..................................................................................... 3
Agar............................................................................................................ 12
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 121 ± 3 °C pendant 15 minutes
► En microbiologie alimentaire
Le milieu Standard Methods Agar (PCA) bioMérieux” SA est utilisée pour le
dénombrement des micro-organismes aérobies (bactéries, levures et moisissures)
se développant à 30 °C dans les produits alimentaires destinés à la consommation
humaine ou à l’alimentation animale.
Il est ainsi conforme à la norme NF EN ISO 4833 (2003) qui impose l'utilisation d’une gélose PCA avec glucose pour ces denrées alimentaires, ainsi qu'à
la méthode de routine de la norme NF V 08-051 (1999). La première nonne est
citée comme méthode d’analyse de référence, pour la recherche du « nombre de
colonies aérobies » dans certaines denrées alimentaires, d’après le règlement
(CE) n° 2073/2005 de la Commission des Communautés européennes du
15 novembre 2005 {cf. deuxième partie, chapitre 1 « Principaux micro-organismes recherchés en routine », paragraphe 1.1.1.2.).
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d'eau purifiée est :
Peptone de caséine (bovin)...................................................................
5,0
Extrait de levure....................................................................................
2,5
Glucose....................................................................................................
1
Agar.......................................................................................................... 15
pH 7,0
Stérilisation à l’autoclave : 15 minutes à 120 °C
► Mode opératoire
-déposer tout d'abord 1 mL de l’échantillon ou de la suspension mère (première dilution) dans une boîte de Petri vide stérile à l'aide d'une pipette de 1 ml
stérile à usage unique ;