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Préparation et stérilisation
du matériel et des milieux de culture
Ce travail de préparation demeure important en travaux pratiques de microbiologie, mais il va en se réduisant dans les laboratoires d'analyses microbiologiques
de routine. En effet, ces derniers utilisent de plus en plus de milieux de culture
prêts à l’emploi, commercialisés par les fabricants de produits de microbiologie,
en raison des contraintes imposées par les référentiels de qualité.
1.
Préparation du matériel courant
- La
photocopie non
autorisée est un
délit
1.1.
Lavage des récipients
Le matériel (tubes de culture, fioles d’Erlenmeyer, ballons...) ne peut être lavé
qu'après avoir été décontaminé (cf première partie, chapitre 1 « Conception du
laboratoire, fonctionnement et sécurité ». paragraphe 3).
Il est nettoyé tout d’abord à la goupillonneuse électrique avec de l’eau chaude
additionnée d’un détergent synthétique adapté, puis en machine à laver ou en
« laveur de verrerie ». Ces machines professionnelles, adaptées au nettoyage de
la verrerie de laboratoire offrent, suivant les modèles, 8 à 20 programmes de
fonctionnement, assurent une thermodésinfection (10 minutes à 95 °C environ)
et un rinçage éventuel avec de l’eau déminéralisée.
1.2.
Bouchage des récipients
Les récipients peuvent encore être bouchés au coton cardé hydrophobe, qui ne
conserve pas l'humidité après le passage à l'autoclave. Ce bouchon en coton
cardé est le plus souvent remplacé par un bouchon en ouate de cellulose comprimée, perméable aux gaz et stérilisable (cf. infra, paragraphe 3.) : de différentes
formes et diamètres, il permet de boucher des fioles et des tubes de culture.
En ce qui concerne les tubes de culture, ils sont remplacés dans la quasi3 totalité des préparations par des tubes en verre borosilicaté à vis avec bouchons
en aluminium ou autre matériau (phénoplaste...) et joints d'étanchéité
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