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Microbiologie pratique pour le laboratoire d analyses ou de contrôle sanitaire
— tout en préparant les dilutions décimales de 1 échantillon ou de la suspension
mère (cf. supra, paragraphe 3.1.), apporter simultanément 1 mL de chaque dilution dans une boîte de Pétri vide stérile ;
-couler dans chaque boîte de Pétri 10 à 12 mL de milieu fondu (refroidià
47±2°C) en microbiologie alimentaire et 15 à 20 mL en microbiologie des
eaux. Mélanger soigneusement et laisser solidifier le milieu.
En microbiologie alimentaire, lorsque 1 aliment a analyser est susceptible de
contenir trop de micro-organismes à colonies envahissantes, il faut couler à la
surface du milieu solidifié 4 mL d’une gélose non nutritive ramenée entre 44 el
47 °C et la laisser solidifier.
La gélose non nutritive, appelée également « gélose blanche », de pH 7,0 à
25 °C, contient 12 à 18 g d’agar pour 1 000 mL d’eau distillée.
Incuber les boîtes, en position renversée, à la température et pendant le temps
prescrits par la norme.
► Lecture et interprétation
Compter le nombre de colonies bactériennes par boîte de Pétri se développant
dans ou sur la gélose. En général, il faut éliminer les boîtes ayant moins de
15 colonies et plus de 300 colonies (cf. normes précitées, en microbiologie des
aliments et des eaux ou les normes énoncées dans les tableaux 27A et 27B du
paragraphe infra 3.2.1.2.).
Exprimer le nombre d’unités formant colonies bactéries (UFC/mL) dans le
produit analysé.
3.2.1.2. Avec des milieux sélectifs de germes spécifiques
Il s'agit de milieux sélectifs de recherche et de dénombrement de micro-organismes et principalement de bactéries recherchées dans les contrôles de qualité
des aliments ou d’autres produits. Les germes les plus couramment recherchés en
appliquant les normes existantes sont regroupés dans les tableaux 27A et 27B.
Tableau 27A ■ Recherche et dénombrement de micro-organismes suivant les normes
existantes.
Recherche et dénombrement de...
Normes
Bacillus cereus dans les aliments
Norme NF EN ISO 7932 (2005)
NF EN ISO 21871 (2006) pour les B. cereus
présumés en petit nombre
Bactéries aérobies mésophiles dans les
produits cosmétiques1
ISO/D1S 21149 et norme NF ISO 21149 (2006)
Bactéries sultito-réductrices en conditions
anaérobies dans les aliments
Norme NF ISO 15213 (2003), [méthode en boîte
de Pétri, (cf. également en tubes, infra, tableau 31)1
Norme expérimentale de routine française XP »
08-061 (2005)
Campylobacter spp. dans les aliments
ISO7TS 10272-2 (2006) (cf. supra tableau 26A) et
NF EN ISO 10272-1 (2006)
( ampylohacter (espèces thermotolérantes) dans les eaux
Norme ISO 17995 (2005)
Microbiologie pratique pour le laboratoire d analyses ou de contrôle sanitaire
— tout en préparant les dilutions décimales de 1 échantillon ou de la suspension
mère (cf. supra, paragraphe 3.1.), apporter simultanément 1 mL de chaque dilution dans une boîte de Pétri vide stérile ;
-couler dans chaque boîte de Pétri 10 à 12 mL de milieu fondu (refroidià
47±2°C) en microbiologie alimentaire et 15 à 20 mL en microbiologie des
eaux. Mélanger soigneusement et laisser solidifier le milieu.
En microbiologie alimentaire, lorsque 1 aliment a analyser est susceptible de
contenir trop de micro-organismes à colonies envahissantes, il faut couler à la
surface du milieu solidifié 4 mL d’une gélose non nutritive ramenée entre 44 el
47 °C et la laisser solidifier.
La gélose non nutritive, appelée également « gélose blanche », de pH 7,0 à
25 °C, contient 12 à 18 g d’agar pour 1 000 mL d’eau distillée.
Incuber les boîtes, en position renversée, à la température et pendant le temps
prescrits par la norme.
► Lecture et interprétation
Compter le nombre de colonies bactériennes par boîte de Pétri se développant
dans ou sur la gélose. En général, il faut éliminer les boîtes ayant moins de
15 colonies et plus de 300 colonies (cf. normes précitées, en microbiologie des
aliments et des eaux ou les normes énoncées dans les tableaux 27A et 27B du
paragraphe infra 3.2.1.2.).
Exprimer le nombre d’unités formant colonies bactéries (UFC/mL) dans le
produit analysé.
3.2.1.2. Avec des milieux sélectifs de germes spécifiques
Il s'agit de milieux sélectifs de recherche et de dénombrement de micro-organismes et principalement de bactéries recherchées dans les contrôles de qualité
des aliments ou d’autres produits. Les germes les plus couramment recherchés en
appliquant les normes existantes sont regroupés dans les tableaux 27A et 27B.
Tableau 27A ■ Recherche et dénombrement de micro-organismes suivant les normes
existantes.
Recherche et dénombrement de...
Normes
Bacillus cereus dans les aliments
Norme NF EN ISO 7932 (2005)
NF EN ISO 21871 (2006) pour les B. cereus
présumés en petit nombre
Bactéries aérobies mésophiles dans les
produits cosmétiques1
ISO/D1S 21149 et norme NF ISO 21149 (2006)
Bactéries sultito-réductrices en conditions
anaérobies dans les aliments
Norme NF ISO 15213 (2003), [méthode en boîte
de Pétri, (cf. également en tubes, infra, tableau 31)1
Norme expérimentale de routine française XP »
08-061 (2005)
Campylobacter spp. dans les aliments
ISO7TS 10272-2 (2006) (cf. supra tableau 26A) et
NF EN ISO 10272-1 (2006)
( ampylohacter (espèces thermotolérantes) dans les eaux
Norme ISO 17995 (2005)