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par PCR et PCR-fusion de gènes tronqués ou fusionnés, mutagenèse ponctuelle dirigée avec
le système Ung-/Dut-, etc.).
Les cassettes une fois introduites vont avoir différents devenirs en fonction de leur
caractéristiques, mais souvent elles vont devoir s'intégrer au sein du/des chromosome(s) de la
cellule par recombinaison.
Figure 7.20: mode d’intégration d’un ADN exogène
7.8.1. Comment inactiver un gène
Actuellement, il existe de nombreuses techniques pour inactiver des gènes et ainsi obtenir des
allèles nuls. La technologie utilisée dépend de l'organisme et de ses propriétés biologiques.
 La première méthode : mise au point consistait à transformer la cellule avec une molécule
d'ADN circulaire portant un petit morceau du gène à inactiver pour obtenir ce que l'on appelle
une disruption. Cependant, ce type de mutation peut dans certains cas ne pas être nul car un
petit morceau de la protéine est fabriqué.
 La deuxième méthode : faire un remplacement de gène, ce qui implique la transformation
avec un fragment d'ADN linéaire et deux crossing-over.
Dans les deux cas, il faut sélectionner les transformants, ce qui est fait le plus souvent grâce
aux deux systèmes de sélection (marqueur de sélection utilisé): l’acquisition d’un gène de