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complexe, à un moment donné et dans un état donné par rapport à un échantillon de
référence.
Appelé encore DNA chip, DNA-microarray, biochip
Les Etapes de réalisation d’une puce à ADN:
• Extraction des ARN totaux des cellules, dont on veut comparer l’expression des gènes
avec un étalon.
• Production des ADNc par rétrotranscription
• marquage par un colorant (soit la Cyanine 3 (fluorochrome vert) soit la Cyanine 5
(fluorochrome rouge)).
• On met ensuite les ADNc obtenus dans une puce contenant des fragments d’ADN, en
même temps que l’ADNc étalon.
• Chaque point (ou spot) de la puce va être analysé individuellement par un scanner à
très haute résolution, et ce à la longueur d’onde d’excitation de la Cyanine 3 puis de la
Cyanine 5. L’image scannée va être traduite en niveaux de gris.
Figure 4.9. Exemple d’expression des gènes dans deux populations différentes
Les gènes retrouvés dans les cellules références sont en vert, ceux de la population 2 sont en
rouge et ceux retrouvés dans les deux sont en jaunes.