Chapitre IV
Matériel et méthodes d’analyse
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 Ajouter 20 ml d’hexane dans la colonne.
 Peser 5g de gel de silice, le mélanger avec l’hexane dans un petit bécher et le faire introduire
dans la colonne par un petit entonnoir de 4 cm de diamètre.
 Frapper la colonne doucement pour qu’elle ne se casse pas à l’aide d’une spatule, et pour
faire tasser l’alumine.
 Laisser couler l’hexane en évitant l’assèchement de la colonne.
 Peser 5g d’alumine, le mélanger avec l’hexane dans un petit bécher et le faire introduire dans
la colonne par un petit entonnoir.
 Tasser bien l’alumine à l’aide d’une spatule.
 Laisser couler l’hexane jusqu’à atteindre un volume de 2 ml afin d’éviter l’assèchement de
la colonne.
 Ajouter 0,5 g de Na2SO4 afin d’absorber l’eau si elle existe
 À présent la colonne est prête à l’utilisation, à noter qu’il faut répéter les mêmes étapes
après introduction de chaque échantillon.
2. Fractionnement de la phase aliphatique
 Introduire l’échantillon dans la colonne après agitation.
 Ajouter 20 ml d’hexane.
 Récupérer la première phase qui est la fraction aliphatique dans des flacons en verre
conditionnés au préalable d’une contenance de 25 ml. Et les fermés avec un bouchon séparé
par du papier aluminium et enroulé avec du téflon.
 Conserver les flacons au frais.
3. fractionnement de la phase aromatique
 Ajouter 20 ml du mélange d’hexane-dichlorométhane dans les proportions (90/10).
 Ajouter 30 ml du mélange hexane-dichlorométhane dans les proportions (70/30).
 Récupérer la deuxième fraction qui est la phase aromatique dans des tubes à essais
conditionnés.
 Faire une deuxième concentration sous jet d’azote.
 Conserver les échantillons au frais.
f. Analyse des HAP par spectrofluorimètre ultraviolet
Principe de la SFUV
La SFUV mesure l’émission de la fluorescence des molécules soumises à un rayonnement
d’excitation ultra-violet. Cette technique d’analyse nécessite des radiations