Chapitre III
MATERIELS ET METHODES
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que la bactérie est et qu’elle possède la cytochrome oxydase, dans le cas contraire la bactérie
est oxydase –.
➢
Test TSI
La gélose TSI (Triple Sugar Iron) permet
l’identification des Enterobacteries par la mise en évidence
rapide de la fermentation du lactose, du glucose (avec ou sans
production de gaz), du saccharose et de la production de
sulfure d’hydrogène.
a)
Mode opératoire
A partir d’une colonie suspecte prélevée sur un milieu d’isolement sélectif,
ensemencer le culot par piqure centrale et la surface inclinée par des stries serrées.
Incuber à 37°C pendant 18-24 heures.
b)
Lecture
L’utilisation de l’un des sucres contenus dans le milieu se traduit par une acidification
(virage au jaune du rouge de phénol). Une alcalinisation se révèle par une coloration rouge
foncée. La production de sulfure d’hydrogène à partir du thiosulfate est mise en évidence par
la formation d’une coloration noire.
La gélose TSI fournit quatre renseignements principaux :
✓
Fermentation de glucose
•
Culot rouge : glucose non fermenté.
•
Culot jaune : glucose fermenté.
✓
Fermentation du lactose et/ou du saccharose
•
Pente inclinée rouge : lactose et saccharose non fermentés.
•
Pente inclinée jaune : lactose et/ ou saccharose fermenté.
✓
Production de gaz
•
apparition de gaz dans le culot.
✓
Formation d’H2S
•
formation d’une coloration noire entre le culot et la pente ou le long de la
piqure.
➢
Identification par la méthode des galeries API
Photo 10 : Test TSI